实用癌症杂志
實用癌癥雜誌
실용암증잡지
THE PRACTICAL JOURNAL OF CANCER
2002年
5期
455-457
,共3页
严瑞兰%张积仁%辛晓燕%金明%惠宏襄
嚴瑞蘭%張積仁%辛曉燕%金明%惠宏襄
엄서란%장적인%신효연%금명%혜굉양
血管内皮生长因子%发夹状核酶基因%真核表达载体%Hela细胞
血管內皮生長因子%髮夾狀覈酶基因%真覈錶達載體%Hela細胞
혈관내피생장인자%발협상핵매기인%진핵표체재체%Hela세포
目的构建VEGF特异性发夹状核酶基因真核表达载体,观察其对Hela细胞VEGF表达的调节.方法将核酶基因克隆入pcDNA3中,构建了抗VEGF发夹状核酶真核表达载体pcDNA3-RZ,并进行了核酶的体外切割活性检测.将该真核表达载体转染人宫颈癌Hela细胞,采用RNA斑点杂交、流式细胞仪免疫荧光及免疫细胞化学方法,检测Hela细胞中VEGF mRNA和VEGF蛋白的表达水平.结果所构建的重组表达载体pcDNA3-RZ正确,体外切割检测该核酶具有较高的切割活性.转染了pcDNA3-RZ的Hela细胞中VEGF mRNA和VEGF蛋白的表达水平明显下降.结论成功地构建了抗VEGF发夹状核酶基因真核表达载体,该载体能明显抑制Hela细胞VEGF的表达.
目的構建VEGF特異性髮夾狀覈酶基因真覈錶達載體,觀察其對Hela細胞VEGF錶達的調節.方法將覈酶基因剋隆入pcDNA3中,構建瞭抗VEGF髮夾狀覈酶真覈錶達載體pcDNA3-RZ,併進行瞭覈酶的體外切割活性檢測.將該真覈錶達載體轉染人宮頸癌Hela細胞,採用RNA斑點雜交、流式細胞儀免疫熒光及免疫細胞化學方法,檢測Hela細胞中VEGF mRNA和VEGF蛋白的錶達水平.結果所構建的重組錶達載體pcDNA3-RZ正確,體外切割檢測該覈酶具有較高的切割活性.轉染瞭pcDNA3-RZ的Hela細胞中VEGF mRNA和VEGF蛋白的錶達水平明顯下降.結論成功地構建瞭抗VEGF髮夾狀覈酶基因真覈錶達載體,該載體能明顯抑製Hela細胞VEGF的錶達.
목적구건VEGF특이성발협상핵매기인진핵표체재체,관찰기대Hela세포VEGF표체적조절.방법장핵매기인극륭입pcDNA3중,구건료항VEGF발협상핵매진핵표체재체pcDNA3-RZ,병진행료핵매적체외절할활성검측.장해진핵표체재체전염인궁경암Hela세포,채용RNA반점잡교、류식세포의면역형광급면역세포화학방법,검측Hela세포중VEGF mRNA화VEGF단백적표체수평.결과소구건적중조표체재체pcDNA3-RZ정학,체외절할검측해핵매구유교고적절할활성.전염료pcDNA3-RZ적Hela세포중VEGF mRNA화VEGF단백적표체수평명현하강.결론성공지구건료항VEGF발협상핵매기인진핵표체재체,해재체능명현억제Hela세포VEGF적표체.
