中国肿瘤
中國腫瘤
중국종류
BULLETIN OF CHINESE CANCER
2005年
2期
119-121
,共3页
陈蓉明%应敏刚%郑秋红%蔡述华%龚福生
陳蓉明%應敏剛%鄭鞦紅%蔡述華%龔福生
진용명%응민강%정추홍%채술화%공복생
癌胚抗原%基因克隆%载体构建%核酸疫苗
癌胚抗原%基因剋隆%載體構建%覈痠疫苗
암배항원%기인극륭%재체구건%핵산역묘
[目的]将人癌胚抗原(CEA)cDNA克隆到真核表达载体pIRES中,构建真核表达质粒pIRES-CEA,以期在哺乳动物细胞中高效、稳定表达,并为下一步连接上热休克蛋白基因(HSP70)从而构建CEA-HSP融合核酸疫苗作准备.[方法]从CEA阳性的大肠癌组织中提取总RNA,经RT-PCR方法获取人癌胚抗原cDNA,用内切酶Xba Ⅰ和Not Ⅰ分别酶切质粒pIRES和CEA cDNA,通过T4连接酶将带有黏性末端的CEA-cDNA插入到pIRES质粒的XbaⅠ和NotⅠ酶切位点上.[结果]通过PCR扩增获得了CEA基因,并将CEA-cDNA正向克隆到载体pIRES中.[结论]已经成功构建了真核表达质粒pIRES-CEA,并为下一步连接上热休克蛋白基因(HSP70)从而构建CEA-HSP融合核酸疫苗作准备.
[目的]將人癌胚抗原(CEA)cDNA剋隆到真覈錶達載體pIRES中,構建真覈錶達質粒pIRES-CEA,以期在哺乳動物細胞中高效、穩定錶達,併為下一步連接上熱休剋蛋白基因(HSP70)從而構建CEA-HSP融閤覈痠疫苗作準備.[方法]從CEA暘性的大腸癌組織中提取總RNA,經RT-PCR方法穫取人癌胚抗原cDNA,用內切酶Xba Ⅰ和Not Ⅰ分彆酶切質粒pIRES和CEA cDNA,通過T4連接酶將帶有黏性末耑的CEA-cDNA插入到pIRES質粒的XbaⅠ和NotⅠ酶切位點上.[結果]通過PCR擴增穫得瞭CEA基因,併將CEA-cDNA正嚮剋隆到載體pIRES中.[結論]已經成功構建瞭真覈錶達質粒pIRES-CEA,併為下一步連接上熱休剋蛋白基因(HSP70)從而構建CEA-HSP融閤覈痠疫苗作準備.
[목적]장인암배항원(CEA)cDNA극륭도진핵표체재체pIRES중,구건진핵표체질립pIRES-CEA,이기재포유동물세포중고효、은정표체,병위하일보련접상열휴극단백기인(HSP70)종이구건CEA-HSP융합핵산역묘작준비.[방법]종CEA양성적대장암조직중제취총RNA,경RT-PCR방법획취인암배항원cDNA,용내절매Xba Ⅰ화Not Ⅰ분별매절질립pIRES화CEA cDNA,통과T4련접매장대유점성말단적CEA-cDNA삽입도pIRES질립적XbaⅠ화NotⅠ매절위점상.[결과]통과PCR확증획득료CEA기인,병장CEA-cDNA정향극륭도재체pIRES중.[결론]이경성공구건료진핵표체질립pIRES-CEA,병위하일보련접상열휴극단백기인(HSP70)종이구건CEA-HSP융합핵산역묘작준비.
