西北农林科技大学学报（自然科学版）
西北農林科技大學學報（自然科學版）
서북농림과기대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2007年
1期
19-23
,共5页
吴春涛%王建华%侯相山%霍雷%侯艳梅%牛钟相
吳春濤%王建華%侯相山%霍雷%侯豔梅%牛鐘相
오춘도%왕건화%후상산%곽뢰%후염매%우종상
牛疱疹病毒Ⅰ型%gB基因%原核表达
牛皰疹病毒Ⅰ型%gB基因%原覈錶達
우포진병독Ⅰ형%gB기인%원핵표체
用PCR法扩增了牛疱疹病毒Ⅰ型Bartha Nu/67 株gB基因,将其插入原核表达载体pBAD/TOPO中构建重组质粒pBAD-gB.将pBAD-gB质粒转化大肠杆菌TOP10后进行了诱导表达,对表达产物进行了纯化和抗原性检测,并通过改变诱导剂L-Arabinose的浓度和诱导时间对诱导表达条件进行了优化.结果表明,重组质粒pBAD-gB构建成功,gB蛋白获得了高效表达,并以包涵体形式存在,纯化后gB蛋白的纯度达90%以上,gB蛋白抗原性良好,最佳诱导表达条件:L-Arabinose终浓度为0.2 g/L,诱导时间为5 h.
用PCR法擴增瞭牛皰疹病毒Ⅰ型Bartha Nu/67 株gB基因,將其插入原覈錶達載體pBAD/TOPO中構建重組質粒pBAD-gB.將pBAD-gB質粒轉化大腸桿菌TOP10後進行瞭誘導錶達,對錶達產物進行瞭純化和抗原性檢測,併通過改變誘導劑L-Arabinose的濃度和誘導時間對誘導錶達條件進行瞭優化.結果錶明,重組質粒pBAD-gB構建成功,gB蛋白穫得瞭高效錶達,併以包涵體形式存在,純化後gB蛋白的純度達90%以上,gB蛋白抗原性良好,最佳誘導錶達條件:L-Arabinose終濃度為0.2 g/L,誘導時間為5 h.
용PCR법확증료우포진병독Ⅰ형Bartha Nu/67 주gB기인,장기삽입원핵표체재체pBAD/TOPO중구건중조질립pBAD-gB.장pBAD-gB질립전화대장간균TOP10후진행료유도표체,대표체산물진행료순화화항원성검측,병통과개변유도제L-Arabinose적농도화유도시간대유도표체조건진행료우화.결과표명,중조질립pBAD-gB구건성공,gB단백획득료고효표체,병이포함체형식존재,순화후gB단백적순도체90%이상,gB단백항원성량호,최가유도표체조건:L-Arabinose종농도위0.2 g/L,유도시간위5 h.
