生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2007年
3期
454-456
,共3页
张春华%李芳秋%杨爱龙%缪家文%朱锡旭
張春華%李芳鞦%楊愛龍%繆傢文%硃錫旭
장춘화%리방추%양애룡%무가문%주석욱
精子蛋白Sp17%Egr-1启动子%X线%表达%卵巢癌细胞模型
精子蛋白Sp17%Egr-1啟動子%X線%錶達%卵巢癌細胞模型
정자단백Sp17%Egr-1계동자%X선%표체%란소암세포모형
目的:构建pEgr-Sp17重组质粒,并检测其在人卵巢癌细胞系HO8910中的辐射诱导表达,探索Egr-1基因调控序列辐射诱导下游基因表达的功能,建立放射诱导表达人精子蛋白Sp17的细胞模型.方法:用双酶切、粘端连接的方法构建含有辐射诱导特性的早期反应因子Egr-1和人Sp17基因的pEgr-Sp17重组质粒,利用脂质体介导其转染人HO8910细胞,用免疫细胞化学方法检测X线照射后被转染细胞中Sp17的表达.在确证Sp17能瞬时表达后,继续用含G418的RPMI1640培养基培养细胞,筛选稳定表达Sp17的细胞株.结果:测序结果和酶切鉴定均证实pEgr-Sp17重组质粒构建正确;免疫细胞化学试验表明pEgr-Sp17重组质粒转染的人HO8910细胞表达Sp17蛋白.结论:x线可诱导pEgr-Sp17重组质粒在人HO8910细胞中表达Sp17蛋白,构建了Sp17蛋白放射诱导表达的卵巢癌细胞模型.
目的:構建pEgr-Sp17重組質粒,併檢測其在人卵巢癌細胞繫HO8910中的輻射誘導錶達,探索Egr-1基因調控序列輻射誘導下遊基因錶達的功能,建立放射誘導錶達人精子蛋白Sp17的細胞模型.方法:用雙酶切、粘耑連接的方法構建含有輻射誘導特性的早期反應因子Egr-1和人Sp17基因的pEgr-Sp17重組質粒,利用脂質體介導其轉染人HO8910細胞,用免疫細胞化學方法檢測X線照射後被轉染細胞中Sp17的錶達.在確證Sp17能瞬時錶達後,繼續用含G418的RPMI1640培養基培養細胞,篩選穩定錶達Sp17的細胞株.結果:測序結果和酶切鑒定均證實pEgr-Sp17重組質粒構建正確;免疫細胞化學試驗錶明pEgr-Sp17重組質粒轉染的人HO8910細胞錶達Sp17蛋白.結論:x線可誘導pEgr-Sp17重組質粒在人HO8910細胞中錶達Sp17蛋白,構建瞭Sp17蛋白放射誘導錶達的卵巢癌細胞模型.
목적:구건pEgr-Sp17중조질립,병검측기재인란소암세포계HO8910중적복사유도표체,탐색Egr-1기인조공서렬복사유도하유기인표체적공능,건립방사유도표체인정자단백Sp17적세포모형.방법:용쌍매절、점단련접적방법구건함유복사유도특성적조기반응인자Egr-1화인Sp17기인적pEgr-Sp17중조질립,이용지질체개도기전염인HO8910세포,용면역세포화학방법검측X선조사후피전염세포중Sp17적표체.재학증Sp17능순시표체후,계속용함G418적RPMI1640배양기배양세포,사선은정표체Sp17적세포주.결과:측서결과화매절감정균증실pEgr-Sp17중조질립구건정학;면역세포화학시험표명pEgr-Sp17중조질립전염적인HO8910세포표체Sp17단백.결론:x선가유도pEgr-Sp17중조질립재인HO8910세포중표체Sp17단백,구건료Sp17단백방사유도표체적란소암세포모형.
