中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2008年
11期
1364-1366
,共3页
林旎%戴琳孙%程祖建%杨滨%李雯%陈勇%江凌%欧启水
林旎%戴琳孫%程祖建%楊濱%李雯%陳勇%江凌%歐啟水
림니%대림손%정조건%양빈%리문%진용%강릉%구계수
CAP10基因%FQ-PCR%新型隐球菌
CAP10基因%FQ-PCR%新型隱毬菌
CAP10기인%FQ-PCR%신형은구균
目的 建立FQ-PCR(real-time Fluorescent Quantitative PCR)系统定量检测新型隐球菌CAP10基因,为将其应用于新型隐球菌感染的诊断和疗效判断奠定基础.方法 根据新型隐球菌5种血清型(A、B、C、D、AD)中同源序列设计引物和探针,PCR扩增CAP10基因片段,并将其克隆到pGEM-T Easy载体上,构建质粒标准品;建立FQ-PCa体系,优化反应条件,建立标准曲线,进行特异性、敏感性、重复性实验.结果 FQ-PCR系统用于检测CAPl0基因片段,敏感性为1拷贝数/μl,重复性好,批内变异系数(CV)为1.36%,批间变异系数(CV)为1.86%,特异性好,对临床其他常见脑膜炎病原体不出现特异性扩增曲线.结论 成功建立了新型隐球菌CAP10基因rQ-PCR检测方法,结果稳定、准确,有望为判断新型隐球菌性脑膜炎疗效、预后提供新的依据.
目的 建立FQ-PCR(real-time Fluorescent Quantitative PCR)繫統定量檢測新型隱毬菌CAP10基因,為將其應用于新型隱毬菌感染的診斷和療效判斷奠定基礎.方法 根據新型隱毬菌5種血清型(A、B、C、D、AD)中同源序列設計引物和探針,PCR擴增CAP10基因片段,併將其剋隆到pGEM-T Easy載體上,構建質粒標準品;建立FQ-PCa體繫,優化反應條件,建立標準麯線,進行特異性、敏感性、重複性實驗.結果 FQ-PCR繫統用于檢測CAPl0基因片段,敏感性為1拷貝數/μl,重複性好,批內變異繫數(CV)為1.36%,批間變異繫數(CV)為1.86%,特異性好,對臨床其他常見腦膜炎病原體不齣現特異性擴增麯線.結論 成功建立瞭新型隱毬菌CAP10基因rQ-PCR檢測方法,結果穩定、準確,有望為判斷新型隱毬菌性腦膜炎療效、預後提供新的依據.
목적 건립FQ-PCR(real-time Fluorescent Quantitative PCR)계통정량검측신형은구균CAP10기인,위장기응용우신형은구균감염적진단화료효판단전정기출.방법 근거신형은구균5충혈청형(A、B、C、D、AD)중동원서렬설계인물화탐침,PCR확증CAP10기인편단,병장기극륭도pGEM-T Easy재체상,구건질립표준품;건립FQ-PCa체계,우화반응조건,건립표준곡선,진행특이성、민감성、중복성실험.결과 FQ-PCR계통용우검측CAPl0기인편단,민감성위1고패수/μl,중복성호,비내변이계수(CV)위1.36%,비간변이계수(CV)위1.86%,특이성호,대림상기타상견뇌막염병원체불출현특이성확증곡선.결론 성공건립료신형은구균CAP10기인rQ-PCR검측방법,결과은정、준학,유망위판단신형은구균성뇌막염료효、예후제공신적의거.
