肾脏病与透析肾移植杂志
腎髒病與透析腎移植雜誌
신장병여투석신이식잡지
CHINESE JOURNAL OF NEPHROLOGY,DIALYSIS & TRANSPLANTATION
2009年
1期
27-34
,共8页
芦怡舟%刘志红%陈朝红%郑春霞%张明超%黎磊石
蘆怡舟%劉誌紅%陳朝紅%鄭春霞%張明超%黎磊石
호이주%류지홍%진조홍%정춘하%장명초%려뢰석
白细胞介素4%白细胞介素13%肾小管上皮细胞%局灶节段性肾小球硬化%RANTES%信号转导子和转录激活子
白細胞介素4%白細胞介素13%腎小管上皮細胞%跼竈節段性腎小毬硬化%RANTES%信號轉導子和轉錄激活子
백세포개소4%백세포개소13%신소관상피세포%국조절단성신소구경화%RANTES%신호전도자화전록격활자
目的:研究肾小管上皮细胞IL-4受体和IL-13受体的表达及IL-4和IL-13对肾小管上皮细胞形态和功能的影响,并探讨其作用机制. 方法:借助人近端肾小管上皮细胞系(HK2),采用RT-PCR,免疫荧光方法检测HK2上IL-4受体和IL-13受体的表达.免疫荧光方法观察不同浓度IL-4和IL-13干预HK2细胞12～48h后HK2损伤标志物RANTES的变化情况.Western blot方法检测IL-4和IL-13干预HK2细胞后,JAK-STAT 6信号通路的活化以及JAK-STAT 6信号通路特异性抑制剂来氟米特对IL-4和IL-13作用HK2细胞的影响. 结果:(1)RT-PCR和免疫荧光结果显示HK2有IL-4 II型受体和IL-13 I型受体mRNA和蛋白质表达.(2)IL-4和IL-13呈时间-剂量依赖性影响上皮细胞RANTES的表达.100 ng/ml IL-4、50 ng/ml IL-13作用48h对HK2的损伤作用最为明显.正常HK2细胞RANTES呈阴性,100 ng/ml IL-4和50 ng/ml IL-13干预48h后,阳性细胞显著增多.(3)Western blot方法结果显示JAK-STAT6磷酸化水平均在IL-4和IL-13 50 ng/ml作用10 min时开始升高,IL-4 100 ng/ml作用20 min达高峰,IL-13 50 ng/ml 20 min达高峰.JAK-STAT 6信号通路特异性抑制剂来氟米特可阻断JAK-STAT 6信号通路的活化,拮抗IL-4和IL-13诱导的HK2细胞RANTES表达. 结论:(1)本研究首次证实人近端肾小管上皮细胞存在IL-4和IL-13受体的表达.(2)IL-4和IL-13可通过人近端肾小管上皮细胞上的相应受体造成细胞损伤,表现为RANTES表达增加.(3)IL-4和IL-13的上述作用与细胞内JAK-STAT 6信号通路活化密切相关.
目的:研究腎小管上皮細胞IL-4受體和IL-13受體的錶達及IL-4和IL-13對腎小管上皮細胞形態和功能的影響,併探討其作用機製. 方法:藉助人近耑腎小管上皮細胞繫(HK2),採用RT-PCR,免疫熒光方法檢測HK2上IL-4受體和IL-13受體的錶達.免疫熒光方法觀察不同濃度IL-4和IL-13榦預HK2細胞12～48h後HK2損傷標誌物RANTES的變化情況.Western blot方法檢測IL-4和IL-13榦預HK2細胞後,JAK-STAT 6信號通路的活化以及JAK-STAT 6信號通路特異性抑製劑來氟米特對IL-4和IL-13作用HK2細胞的影響. 結果:(1)RT-PCR和免疫熒光結果顯示HK2有IL-4 II型受體和IL-13 I型受體mRNA和蛋白質錶達.(2)IL-4和IL-13呈時間-劑量依賴性影響上皮細胞RANTES的錶達.100 ng/ml IL-4、50 ng/ml IL-13作用48h對HK2的損傷作用最為明顯.正常HK2細胞RANTES呈陰性,100 ng/ml IL-4和50 ng/ml IL-13榦預48h後,暘性細胞顯著增多.(3)Western blot方法結果顯示JAK-STAT6燐痠化水平均在IL-4和IL-13 50 ng/ml作用10 min時開始升高,IL-4 100 ng/ml作用20 min達高峰,IL-13 50 ng/ml 20 min達高峰.JAK-STAT 6信號通路特異性抑製劑來氟米特可阻斷JAK-STAT 6信號通路的活化,拮抗IL-4和IL-13誘導的HK2細胞RANTES錶達. 結論:(1)本研究首次證實人近耑腎小管上皮細胞存在IL-4和IL-13受體的錶達.(2)IL-4和IL-13可通過人近耑腎小管上皮細胞上的相應受體造成細胞損傷,錶現為RANTES錶達增加.(3)IL-4和IL-13的上述作用與細胞內JAK-STAT 6信號通路活化密切相關.
목적:연구신소관상피세포IL-4수체화IL-13수체적표체급IL-4화IL-13대신소관상피세포형태화공능적영향,병탐토기작용궤제. 방법:차조인근단신소관상피세포계(HK2),채용RT-PCR,면역형광방법검측HK2상IL-4수체화IL-13수체적표체.면역형광방법관찰불동농도IL-4화IL-13간예HK2세포12～48h후HK2손상표지물RANTES적변화정황.Western blot방법검측IL-4화IL-13간예HK2세포후,JAK-STAT 6신호통로적활화이급JAK-STAT 6신호통로특이성억제제래불미특대IL-4화IL-13작용HK2세포적영향. 결과:(1)RT-PCR화면역형광결과현시HK2유IL-4 II형수체화IL-13 I형수체mRNA화단백질표체.(2)IL-4화IL-13정시간-제량의뢰성영향상피세포RANTES적표체.100 ng/ml IL-4、50 ng/ml IL-13작용48h대HK2적손상작용최위명현.정상HK2세포RANTES정음성,100 ng/ml IL-4화50 ng/ml IL-13간예48h후,양성세포현저증다.(3)Western blot방법결과현시JAK-STAT6린산화수평균재IL-4화IL-13 50 ng/ml작용10 min시개시승고,IL-4 100 ng/ml작용20 min체고봉,IL-13 50 ng/ml 20 min체고봉.JAK-STAT 6신호통로특이성억제제래불미특가조단JAK-STAT 6신호통로적활화,길항IL-4화IL-13유도적HK2세포RANTES표체. 결론:(1)본연구수차증실인근단신소관상피세포존재IL-4화IL-13수체적표체.(2)IL-4화IL-13가통과인근단신소관상피세포상적상응수체조성세포손상,표현위RANTES표체증가.(3)IL-4화IL-13적상술작용여세포내JAK-STAT 6신호통로활화밀절상관.
