中华器官移植杂志
中華器官移植雜誌
중화기관이식잡지
CHINESE JOURNAL OF ORGAN TRANSPLANTATION
2005年
3期
167-170
,共4页
周毅%林乐岷%宋纯%许评%宋春芳
週毅%林樂岷%宋純%許評%宋春芳
주의%림악민%송순%허평%송춘방
造血干细胞移植%基因表达调控%甲状旁腺激素%小鼠
造血榦細胞移植%基因錶達調控%甲狀徬腺激素%小鼠
조혈간세포이식%기인표체조공%갑상방선격소%소서
目的探讨输注整合有甲状旁腺素(PTH)基因的造血干细胞对甲状旁腺功能低下症的治疗效果.方法将以pcDNA 3.1-PTH为模板扩增出的PTH基因插入到逆转录病毒载体MSCV中,得到含PTH基因的重组质粒,并转染PA317包装细胞,以抗生素Geneticin筛选阳性克隆,获得重组有PTH基因的浓缩病毒悬液,以其感染人脐血造血干细胞,然后注入甲状旁腺功能低下症模型小鼠血中,术后观察小鼠症状的改善情况、血PTH及血钙浓度变化情况.结果所获得的重组有PTH基因的浓缩病毒悬液,其病毒滴度为2×107 CFU/ml,PTH的分泌量为15 ng/48 h(106个细胞),未检测到有野生型病毒存在.实验组小鼠接受转染有PTH基因的血干细胞后,症状改善,血PTH及血钙浓度逐渐上升,并维持于接近正常水平;仅接受重组有PTH基因的浓缩病毒悬液的小鼠,短期内血PTH及血钙浓度明显升高,以后则呈缓慢下降趋势,并逐渐出现甲状旁腺功能低下症的表现;只接受造血干细胞移植的小鼠术后20 d左右全部死亡.结论甲状旁腺功能低下症小鼠接受整合有PTH基因的造血干细胞静脉输注可获得较长期的治疗效果.
目的探討輸註整閤有甲狀徬腺素(PTH)基因的造血榦細胞對甲狀徬腺功能低下癥的治療效果.方法將以pcDNA 3.1-PTH為模闆擴增齣的PTH基因插入到逆轉錄病毒載體MSCV中,得到含PTH基因的重組質粒,併轉染PA317包裝細胞,以抗生素Geneticin篩選暘性剋隆,穫得重組有PTH基因的濃縮病毒懸液,以其感染人臍血造血榦細胞,然後註入甲狀徬腺功能低下癥模型小鼠血中,術後觀察小鼠癥狀的改善情況、血PTH及血鈣濃度變化情況.結果所穫得的重組有PTH基因的濃縮病毒懸液,其病毒滴度為2×107 CFU/ml,PTH的分泌量為15 ng/48 h(106箇細胞),未檢測到有野生型病毒存在.實驗組小鼠接受轉染有PTH基因的血榦細胞後,癥狀改善,血PTH及血鈣濃度逐漸上升,併維持于接近正常水平;僅接受重組有PTH基因的濃縮病毒懸液的小鼠,短期內血PTH及血鈣濃度明顯升高,以後則呈緩慢下降趨勢,併逐漸齣現甲狀徬腺功能低下癥的錶現;隻接受造血榦細胞移植的小鼠術後20 d左右全部死亡.結論甲狀徬腺功能低下癥小鼠接受整閤有PTH基因的造血榦細胞靜脈輸註可穫得較長期的治療效果.
목적탐토수주정합유갑상방선소(PTH)기인적조혈간세포대갑상방선공능저하증적치료효과.방법장이pcDNA 3.1-PTH위모판확증출적PTH기인삽입도역전록병독재체MSCV중,득도함PTH기인적중조질립,병전염PA317포장세포,이항생소Geneticin사선양성극륭,획득중조유PTH기인적농축병독현액,이기감염인제혈조혈간세포,연후주입갑상방선공능저하증모형소서혈중,술후관찰소서증상적개선정황、혈PTH급혈개농도변화정황.결과소획득적중조유PTH기인적농축병독현액,기병독적도위2×107 CFU/ml,PTH적분비량위15 ng/48 h(106개세포),미검측도유야생형병독존재.실험조소서접수전염유PTH기인적혈간세포후,증상개선,혈PTH급혈개농도축점상승,병유지우접근정상수평;부접수중조유PTH기인적농축병독현액적소서,단기내혈PTH급혈개농도명현승고,이후칙정완만하강추세,병축점출현갑상방선공능저하증적표현;지접수조혈간세포이식적소서술후20 d좌우전부사망.결론갑상방선공능저하증소서접수정합유PTH기인적조혈간세포정맥수주가획득교장기적치료효과.