细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2007年
4期
309-311,316
,共4页
陈科%莫朝晖%邢晓为%胡平安%杨幼波%谢艳红
陳科%莫朝暉%邢曉為%鬍平安%楊幼波%謝豔紅
진과%막조휘%형효위%호평안%양유파%사염홍
Pegfp-C3-insig2%3T3-L1细胞%表达
Pegfp-C3-insig2%3T3-L1細胞%錶達
Pegfp-C3-insig2%3T3-L1세포%표체
目的:构建insig 2基因的真核表达质粒, 转染3T3-L1细胞并观察对下游脂肪酸结合蛋白(AP2)mRNA、脂联素mRNA表达的影响.方法:采用RT-PCR法获取小鼠全长insig 2基因, 并克隆入真核表达载体pEGFP-C3中.酶切、测序鉴定后, 经脂质体转染入3T3-L1细胞, 通过荧光显微镜观察及RT-PCR检测其在3T3-L1细胞中的表达及下游基因的变化.结果:成功地构建了pEGFP-C3-insig 2融合基因的真核表达载体, 荧光显微镜观察到pEGFP-C3-insig 2融合蛋白在转染的3T3-L1细胞胞质中的表达, insig 2基因的转录明显上调.转染后24 h、 72 h较0 h AP 2 mRNA和脂联素mRNA的转录水平明显下调.结论:构建了insig 2基因的真核表达质粒, 在转染的3T3-L1细胞中insig 2的过表达可能影响该细胞的脂肪代谢.
目的:構建insig 2基因的真覈錶達質粒, 轉染3T3-L1細胞併觀察對下遊脂肪痠結閤蛋白(AP2)mRNA、脂聯素mRNA錶達的影響.方法:採用RT-PCR法穫取小鼠全長insig 2基因, 併剋隆入真覈錶達載體pEGFP-C3中.酶切、測序鑒定後, 經脂質體轉染入3T3-L1細胞, 通過熒光顯微鏡觀察及RT-PCR檢測其在3T3-L1細胞中的錶達及下遊基因的變化.結果:成功地構建瞭pEGFP-C3-insig 2融閤基因的真覈錶達載體, 熒光顯微鏡觀察到pEGFP-C3-insig 2融閤蛋白在轉染的3T3-L1細胞胞質中的錶達, insig 2基因的轉錄明顯上調.轉染後24 h、 72 h較0 h AP 2 mRNA和脂聯素mRNA的轉錄水平明顯下調.結論:構建瞭insig 2基因的真覈錶達質粒, 在轉染的3T3-L1細胞中insig 2的過錶達可能影響該細胞的脂肪代謝.
목적:구건insig 2기인적진핵표체질립, 전염3T3-L1세포병관찰대하유지방산결합단백(AP2)mRNA、지련소mRNA표체적영향.방법:채용RT-PCR법획취소서전장insig 2기인, 병극륭입진핵표체재체pEGFP-C3중.매절、측서감정후, 경지질체전염입3T3-L1세포, 통과형광현미경관찰급RT-PCR검측기재3T3-L1세포중적표체급하유기인적변화.결과:성공지구건료pEGFP-C3-insig 2융합기인적진핵표체재체, 형광현미경관찰도pEGFP-C3-insig 2융합단백재전염적3T3-L1세포포질중적표체, insig 2기인적전록명현상조.전염후24 h、 72 h교0 h AP 2 mRNA화지련소mRNA적전록수평명현하조.결론:구건료insig 2기인적진핵표체질립, 재전염적3T3-L1세포중insig 2적과표체가능영향해세포적지방대사.
