实用口腔医学杂志
實用口腔醫學雜誌
실용구강의학잡지
JOURNAL OF PRACTICAL STOMATOLOGY
2008年
1期
37-40
,共4页
臧光祥%孙宏晨%穆亚冰%柯小亮%刘超%刘金钟%苏涛
臧光祥%孫宏晨%穆亞冰%柯小亮%劉超%劉金鐘%囌濤
장광상%손굉신%목아빙%가소량%류초%류금종%소도
腺样囊性癌%腺病毒%基因治疗
腺樣囊性癌%腺病毒%基因治療
선양낭성암%선병독%기인치료
目的:探讨以凋亡基因TRA/L为靶基因,腺病毒(Ad)为载体的重组基因治疗载体AdCMV-TRAIL诱导腺样囊性癌细胞系ACC-2凋亡的功能.方法:用携带绿色荧光蛋白基因EGFP的AdCMV-EGFP检测 腺病毒载体对ACC-2的转染效率;将携带TRAIL基因的AdCMV-TRAIL转染ACC-2;应用RT-PCR方法检测转染后TRA/L基因表达;应用倒置显微镜和荧光倒置显微镜观察细胞形态,MTT方法检测细胞存活率,应用流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡率.结果:AdCMV-EGFP在1000 p/cell时转染效率为100%:RT-PCR在实验组检测到594 bp的TRA/L基因;AdCMV-TRAIL组和AdCMV-EGFP组的细胞存活率随着时间逐渐下降,且转染AdCMV-TRAIL的肿瘤细胞比转染AdCMV-EGFP的肿瘤细胞下降快,统计学分析有显著差异(P<0.001).AdCMV-TRAIL和AdCMV-EGFP均能促进腺样囊性癌细胞凋亡,且转染AdCMV-TRAIL 引发细胞凋亡的程度明显较AdCMV-EGFP组大,统计学分析有非常显著的差异(P=0.0005).结论:Ad-CMV-TRAIL在体外能明显抑制ACC-2细胞的活性,有效促使其凋亡;AdCMV-TRAIL可以成为腺样囊性癌转基因治疗的新策略.
目的:探討以凋亡基因TRA/L為靶基因,腺病毒(Ad)為載體的重組基因治療載體AdCMV-TRAIL誘導腺樣囊性癌細胞繫ACC-2凋亡的功能.方法:用攜帶綠色熒光蛋白基因EGFP的AdCMV-EGFP檢測 腺病毒載體對ACC-2的轉染效率;將攜帶TRAIL基因的AdCMV-TRAIL轉染ACC-2;應用RT-PCR方法檢測轉染後TRA/L基因錶達;應用倒置顯微鏡和熒光倒置顯微鏡觀察細胞形態,MTT方法檢測細胞存活率,應用流式細胞儀檢測腫瘤細胞的凋亡率.結果:AdCMV-EGFP在1000 p/cell時轉染效率為100%:RT-PCR在實驗組檢測到594 bp的TRA/L基因;AdCMV-TRAIL組和AdCMV-EGFP組的細胞存活率隨著時間逐漸下降,且轉染AdCMV-TRAIL的腫瘤細胞比轉染AdCMV-EGFP的腫瘤細胞下降快,統計學分析有顯著差異(P<0.001).AdCMV-TRAIL和AdCMV-EGFP均能促進腺樣囊性癌細胞凋亡,且轉染AdCMV-TRAIL 引髮細胞凋亡的程度明顯較AdCMV-EGFP組大,統計學分析有非常顯著的差異(P=0.0005).結論:Ad-CMV-TRAIL在體外能明顯抑製ACC-2細胞的活性,有效促使其凋亡;AdCMV-TRAIL可以成為腺樣囊性癌轉基因治療的新策略.
목적:탐토이조망기인TRA/L위파기인,선병독(Ad)위재체적중조기인치료재체AdCMV-TRAIL유도선양낭성암세포계ACC-2조망적공능.방법:용휴대록색형광단백기인EGFP적AdCMV-EGFP검측 선병독재체대ACC-2적전염효솔;장휴대TRAIL기인적AdCMV-TRAIL전염ACC-2;응용RT-PCR방법검측전염후TRA/L기인표체;응용도치현미경화형광도치현미경관찰세포형태,MTT방법검측세포존활솔,응용류식세포의검측종류세포적조망솔.결과:AdCMV-EGFP재1000 p/cell시전염효솔위100%:RT-PCR재실험조검측도594 bp적TRA/L기인;AdCMV-TRAIL조화AdCMV-EGFP조적세포존활솔수착시간축점하강,차전염AdCMV-TRAIL적종류세포비전염AdCMV-EGFP적종류세포하강쾌,통계학분석유현저차이(P<0.001).AdCMV-TRAIL화AdCMV-EGFP균능촉진선양낭성암세포조망,차전염AdCMV-TRAIL 인발세포조망적정도명현교AdCMV-EGFP조대,통계학분석유비상현저적차이(P=0.0005).결론:Ad-CMV-TRAIL재체외능명현억제ACC-2세포적활성,유효촉사기조망;AdCMV-TRAIL가이성위선양낭성암전기인치료적신책략.