中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
1999年
5期
436-440
,共5页
钟林%尢家马录%肖献忠%孙去病
鐘林%尢傢馬錄%肖獻忠%孫去病
종림%왕가마록%초헌충%손거병
NF-κB%热休克蛋白质类%内皮%一氧化氮%肿瘤坏死因子
NF-κB%熱休剋蛋白質類%內皮%一氧化氮%腫瘤壞死因子
NF-κB%열휴극단백질류%내피%일양화담%종류배사인자
目的:探讨核转录因子-κB(NF-κB)在热休克预处理减轻肿瘤坏死因子-α(TNF-α)所致内皮细胞凋亡中的作用.方法:将培养牛肺动脉内皮细胞(BPAEC)于42℃孵育1 h,37℃再培养16 h后,用TNF-α(2 500 U/mL)损伤24 h,观察BPAEC形态学变化、DNA断裂百分率,抽提DNA作琼脂糖电泳,以确定细胞凋亡情况.Western blot分析70 KD-热休克蛋白(HSP70)合成、NF-κB抑制蛋白I-κBα量的改变以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的生成.凝胶滞留法检测NFkB活性,免疫组织化学染色法分析NFkB的移位.结果:热休克预处理可明显减轻TNF-α所致BPAEC凋亡,表现为与TNF-α损伤组相比,凋亡细胞减少,DNA电泳未出现明显"梯状"条带,DNA断裂百分率降低.进一步实验发现热休克预处理可诱导BPAEC合成HSP70,并可抑制TNF-α引起的BPAEC的I-κBα的降解、NF-κB向细胞核的移位、NF-κB与DNA的结合活性,以及iNOS的生成.结论:热休克预处理可减轻TNF-α所致BPAEC凋亡,其机制与HSP70阻断I-κBα降解,从而抑制NF-κB活化,抑制iNOS转隶合成有关.
目的:探討覈轉錄因子-κB(NF-κB)在熱休剋預處理減輕腫瘤壞死因子-α(TNF-α)所緻內皮細胞凋亡中的作用.方法:將培養牛肺動脈內皮細胞(BPAEC)于42℃孵育1 h,37℃再培養16 h後,用TNF-α(2 500 U/mL)損傷24 h,觀察BPAEC形態學變化、DNA斷裂百分率,抽提DNA作瓊脂糖電泳,以確定細胞凋亡情況.Western blot分析70 KD-熱休剋蛋白(HSP70)閤成、NF-κB抑製蛋白I-κBα量的改變以及誘導型一氧化氮閤酶(iNOS)的生成.凝膠滯留法檢測NFkB活性,免疫組織化學染色法分析NFkB的移位.結果:熱休剋預處理可明顯減輕TNF-α所緻BPAEC凋亡,錶現為與TNF-α損傷組相比,凋亡細胞減少,DNA電泳未齣現明顯"梯狀"條帶,DNA斷裂百分率降低.進一步實驗髮現熱休剋預處理可誘導BPAEC閤成HSP70,併可抑製TNF-α引起的BPAEC的I-κBα的降解、NF-κB嚮細胞覈的移位、NF-κB與DNA的結閤活性,以及iNOS的生成.結論:熱休剋預處理可減輕TNF-α所緻BPAEC凋亡,其機製與HSP70阻斷I-κBα降解,從而抑製NF-κB活化,抑製iNOS轉隸閤成有關.
목적:탐토핵전록인자-κB(NF-κB)재열휴극예처리감경종류배사인자-α(TNF-α)소치내피세포조망중적작용.방법:장배양우폐동맥내피세포(BPAEC)우42℃부육1 h,37℃재배양16 h후,용TNF-α(2 500 U/mL)손상24 h,관찰BPAEC형태학변화、DNA단렬백분솔,추제DNA작경지당전영,이학정세포조망정황.Western blot분석70 KD-열휴극단백(HSP70)합성、NF-κB억제단백I-κBα량적개변이급유도형일양화담합매(iNOS)적생성.응효체류법검측NFkB활성,면역조직화학염색법분석NFkB적이위.결과:열휴극예처리가명현감경TNF-α소치BPAEC조망,표현위여TNF-α손상조상비,조망세포감소,DNA전영미출현명현"제상"조대,DNA단렬백분솔강저.진일보실험발현열휴극예처리가유도BPAEC합성HSP70,병가억제TNF-α인기적BPAEC적I-κBα적강해、NF-κB향세포핵적이위、NF-κB여DNA적결합활성,이급iNOS적생성.결론:열휴극예처리가감경TNF-α소치BPAEC조망,기궤제여HSP70조단I-κBα강해,종이억제NF-κB활화,억제iNOS전대합성유관.
