CAJ | 학술논문

对达兰仔猪睾丸精原细胞及精原干细胞进行了体外分离、纯化和初步鉴定.对8 d达兰仔猪的睾丸实质组织,采用Ⅳ型胶原酶、透明质酸酶和胰酶组合消化法分离精细管细胞,制备单细胞悬液,用Percoll不连续密度(11%、19%、27%、35%和43%)梯度法纯化精原细胞;对纯化后的细胞培养12 h ,细胞贴壁后进行碱性磷酸酶(AKP)染色鉴定,初步确定精原干细胞及其比例.结果表明:所获精细管细胞悬液中活细胞和死细胞所占的比率分别为92.65%和7.35%,平均每克睾丸可获得4.17×107个细胞;精原细胞主要分布于19%～27%的Percoll 梯度带中,经纯化后其纯度为47.62%,精原干细胞占该带细胞的比例为5.52%.因此,采用组合酶消化,结合Percoll 不连续密度梯度离心法分离的达兰仔猪的精原细胞不但能够满足体外培养的需要,还可以做为精原干细胞移植的研究材料.
대체란자저고환정원세포급정원간세포진행료체외분리、순화화초보감정.대8 d체란자저적고환실질조직,채용Ⅳ형효원매、투명질산매화이매조합소화법분리정세관세포,제비단세포현액,용Percoll불련속밀도(11%、19%、27%、35%화43%)제도법순화정원세포;대순화후적세포배양12 h ,세포첩벽후진행감성린산매(AKP)염색감정,초보학정정원간세포급기비례.결과표명:소획정세관세포현액중활세포화사세포소점적비솔분별위92.65%화7.35%,평균매극고환가획득4.17×107개세포;정원세포주요분포우19%～27%적Percoll 제도대중,경순화후기순도위47.62%,정원간세포점해대세포적비례위5.52%.인차,채용조합매소화,결합Percoll 불련속밀도제도리심법분리적체란자저적정원세포불단능구만족체외배양적수요,환가이주위정원간세포이식적연구재료.