现代生物医学进展
現代生物醫學進展
현대생물의학진전
PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE
2008年
6期
1046-1048
,共3页
鲁秀敏%陈锚锚%苏楠%李福兵%赵玲%段亚琪%陈林
魯秀敏%陳錨錨%囌楠%李福兵%趙玲%段亞琪%陳林
로수민%진묘묘%소남%리복병%조령%단아기%진림
破骨细胞%成纤维生长因子受体%RT-PCR%Western blot
破骨細胞%成纖維生長因子受體%RT-PCR%Western blot
파골세포%성섬유생장인자수체%RT-PCR%Western blot
目的:检测成纤维生长因子受体(fibroblast growth factor receptors,FGFRs)在小鼠破骨细胞中的表达情况,为探讨FGFRs时破骨细胞的直接调控作用奠定基础.方法:采用巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)和破骨细胞分化因子(receptor activator of nuclear factor-B ligand,RANKL)诱导小鼠骨髓单核细胞分化为破骨细胞.提取细胞总RNA后经逆转录获得小鼠破骨细胞cDNA,根据FGFRs基因编码区序列设计的引物进行PCR扩增并对PCR扩增产物进行测序.为进一步验证转录水平的结果,提取细胞总蛋白电泳后进行免疫印迹实验.结果:诱导5d后可见TRAP(+)多核细胞出现,小鼠破骨细胞在转录水平和翻译水平均只可检测到FGFR1和FGFR3基因的表达产物.结论:M=CSF和RANKL可成功诱导出小鼠破骨细胞,FGFR1和FGFR3基因在小鼠破骨细胞中均有表达.
目的:檢測成纖維生長因子受體(fibroblast growth factor receptors,FGFRs)在小鼠破骨細胞中的錶達情況,為探討FGFRs時破骨細胞的直接調控作用奠定基礎.方法:採用巨噬細胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)和破骨細胞分化因子(receptor activator of nuclear factor-B ligand,RANKL)誘導小鼠骨髓單覈細胞分化為破骨細胞.提取細胞總RNA後經逆轉錄穫得小鼠破骨細胞cDNA,根據FGFRs基因編碼區序列設計的引物進行PCR擴增併對PCR擴增產物進行測序.為進一步驗證轉錄水平的結果,提取細胞總蛋白電泳後進行免疫印跡實驗.結果:誘導5d後可見TRAP(+)多覈細胞齣現,小鼠破骨細胞在轉錄水平和翻譯水平均隻可檢測到FGFR1和FGFR3基因的錶達產物.結論:M=CSF和RANKL可成功誘導齣小鼠破骨細胞,FGFR1和FGFR3基因在小鼠破骨細胞中均有錶達.
목적:검측성섬유생장인자수체(fibroblast growth factor receptors,FGFRs)재소서파골세포중적표체정황,위탐토FGFRs시파골세포적직접조공작용전정기출.방법:채용거서세포집락자격인자(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)화파골세포분화인자(receptor activator of nuclear factor-B ligand,RANKL)유도소서골수단핵세포분화위파골세포.제취세포총RNA후경역전록획득소서파골세포cDNA,근거FGFRs기인편마구서렬설계적인물진행PCR확증병대PCR확증산물진행측서.위진일보험증전록수평적결과,제취세포총단백전영후진행면역인적실험.결과:유도5d후가견TRAP(+)다핵세포출현,소서파골세포재전록수평화번역수평균지가검측도FGFR1화FGFR3기인적표체산물.결론:M=CSF화RANKL가성공유도출소서파골세포,FGFR1화FGFR3기인재소서파골세포중균유표체.
