CAJ | 학술논문

依据拟南芥、芥菜型油菜和白菜已知超氧化物歧化酶(SOD)保守序列设计引物,用同源序列法和RT-RACE技术克隆甘蓝型油菜Cu/ZnSOD和FeSOD基因,经序列分析和基因片段拼接,得到Cu/ZnSOD和FeSOD基因的全长cDNA,分别为756 bp(GenBank登录号AY970822)和1 037 bp(GenBank登录号EF634058).以cDNA序列设计引物,获得1 322 bp的Cu/ZnSOD基因组DNA(GenBank登录号DQ431853)和1 659 bp的FeSOD基因组DNA(GenBank登录号EF634057).生物信息学分析表明,Cu/ZnSOD基因ORF框长459 bp,编码152个氨基酸残基的蛋白质,在基因组序列结构上具有7个外显子和6个内含子.而FeSOD基因ORF框长792bp,编码263个氨基酸残基的蛋白质,在基因组序列结构上具有8个外显子和7个内含子.二者外显子和内含子交接处完全符合GT/AG规则.利用获得的Cu/ZnSOD的cDNA片段作探针,对菌核病菌诱导甘蓝型油菜叶片的mRNA进行Northern blot分析,结果显示在同一品种(系)中菌核病菌诱导后Cu/ZnSOD mRNA表达量比诱导前升高,抗(耐)型油菜Cu/ZnSOD mRNA表达量明显高于感病型.油菜叶片SOD酶活性分析结果也获得了完全一致的结果.以上结果表明,甘蓝型油菜SOD基因与菌核病抗性相关.
의거의남개、개채형유채화백채이지초양화물기화매(SOD)보수서렬설계인물,용동원서렬법화RT-RACE기술극륭감람형유채Cu/ZnSOD화FeSOD기인,경서렬분석화기인편단병접,득도Cu/ZnSOD화FeSOD기인적전장cDNA,분별위756 bp(GenBank등록호AY970822)화1 037 bp(GenBank등록호EF634058).이cDNA서렬설계인물,획득1 322 bp적Cu/ZnSOD기인조DNA(GenBank등록호DQ431853)화1 659 bp적FeSOD기인조DNA(GenBank등록호EF634057).생물신식학분석표명,Cu/ZnSOD기인ORF광장459 bp,편마152개안기산잔기적단백질,재기인조서렬결구상구유7개외현자화6개내함자.이FeSOD기인ORF광장792bp,편마263개안기산잔기적단백질,재기인조서렬결구상구유8개외현자화7개내함자.이자외현자화내함자교접처완전부합GT/AG규칙.이용획득적Cu/ZnSOD적cDNA편단작탐침,대균핵병균유도감람형유채협편적mRNA진행Northern blot분석,결과현시재동일품충(계)중균핵병균유도후Cu/ZnSOD mRNA표체량비유도전승고,항(내)형유채Cu/ZnSOD mRNA표체량명현고우감병형.유채협편SOD매활성분석결과야획득료완전일치적결과.이상결과표명,감람형유채SOD기인여균핵병항성상관.