作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2009年
6期
1006-1012
,共7页
王旭静%李为民%唐巧玲%贾士荣%王志兴
王旭靜%李為民%唐巧玲%賈士榮%王誌興
왕욱정%리위민%당교령%가사영%왕지흥
Gacab启动子%功能缺失分析%转基因烟草
Gacab啟動子%功能缺失分析%轉基因煙草
Gacab계동자%공능결실분석%전기인연초
分离了金华中棉(Gossypiun arboreum var.jinhua)光诱导基因cab 5'上游的调控序列1 009 bp,并对其功能进行了分析,证明获得的这一DNA片段具有驱动光诱导表达的功能.为了进一步分离具有最大转录活性的最小光诱导启动子,根据光诱导表达调控元件所在的位置,构建了Gacab P和197 bp、504 bp、779 bp的5'端缺失体,并将这些缺失体分别与gus(uid A)基因融合,构建植物表达载体.用农杆菌介导法转化烟草,获得转基因烟草.GUS组织化学分析表明,转基因烟草的T1代种子在光下培养时,只有Gacab P驱动gus基因在转基因烟草的叶片表达,其他3个启动子驱动gus基因在转基因烟草的整个植株中均有表达;当转基因烟草的T1代种子在暗中萌发及培养时,GacabP驱动gus基因在转基因烟草中无表达,其他3个启动子驱动gus基因在转基因烟草的整个植株中均有表达.GUS定量分析表明,-504~-1 bp的启动子缺失体启动活性最高,比CaMV35S启动子高0.6倍.上述结果表明只有全长的Gacab启动子具有光诱导和绿色组织特异表达特性,且-504~-1 bp的启动子缺失体启动活性最高.
分離瞭金華中棉(Gossypiun arboreum var.jinhua)光誘導基因cab 5'上遊的調控序列1 009 bp,併對其功能進行瞭分析,證明穫得的這一DNA片段具有驅動光誘導錶達的功能.為瞭進一步分離具有最大轉錄活性的最小光誘導啟動子,根據光誘導錶達調控元件所在的位置,構建瞭Gacab P和197 bp、504 bp、779 bp的5'耑缺失體,併將這些缺失體分彆與gus(uid A)基因融閤,構建植物錶達載體.用農桿菌介導法轉化煙草,穫得轉基因煙草.GUS組織化學分析錶明,轉基因煙草的T1代種子在光下培養時,隻有Gacab P驅動gus基因在轉基因煙草的葉片錶達,其他3箇啟動子驅動gus基因在轉基因煙草的整箇植株中均有錶達;噹轉基因煙草的T1代種子在暗中萌髮及培養時,GacabP驅動gus基因在轉基因煙草中無錶達,其他3箇啟動子驅動gus基因在轉基因煙草的整箇植株中均有錶達.GUS定量分析錶明,-504~-1 bp的啟動子缺失體啟動活性最高,比CaMV35S啟動子高0.6倍.上述結果錶明隻有全長的Gacab啟動子具有光誘導和綠色組織特異錶達特性,且-504~-1 bp的啟動子缺失體啟動活性最高.
분리료금화중면(Gossypiun arboreum var.jinhua)광유도기인cab 5'상유적조공서렬1 009 bp,병대기공능진행료분석,증명획득적저일DNA편단구유구동광유도표체적공능.위료진일보분리구유최대전록활성적최소광유도계동자,근거광유도표체조공원건소재적위치,구건료Gacab P화197 bp、504 bp、779 bp적5'단결실체,병장저사결실체분별여gus(uid A)기인융합,구건식물표체재체.용농간균개도법전화연초,획득전기인연초.GUS조직화학분석표명,전기인연초적T1대충자재광하배양시,지유Gacab P구동gus기인재전기인연초적협편표체,기타3개계동자구동gus기인재전기인연초적정개식주중균유표체;당전기인연초적T1대충자재암중맹발급배양시,GacabP구동gus기인재전기인연초중무표체,기타3개계동자구동gus기인재전기인연초적정개식주중균유표체.GUS정량분석표명,-504~-1 bp적계동자결실체계동활성최고,비CaMV35S계동자고0.6배.상술결과표명지유전장적Gacab계동자구유광유도화록색조직특이표체특성,차-504~-1 bp적계동자결실체계동활성최고.