生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2009年
3期
221-225
,共5页
任道全%孙斌%张青岩%刘一舟%郭向荣
任道全%孫斌%張青巖%劉一舟%郭嚮榮
임도전%손빈%장청암%류일주%곽향영
Rac1%Cdc42%FRET%单分子探针%表达差异
Rac1%Cdc42%FRET%單分子探針%錶達差異
Rac1%Cdc42%FRET%단분자탐침%표체차이
利用构建的Rac1、Cdc42单分子探针,探索其在NIH3T3、Hela、COS7等活细胞中的最佳表达效果.结果表明在胞浆中表达的探针其荧光值在诱导5～10 min达到最大值,随着时间的推移,其荧光强度逐渐减弱;在细胞膜上表达的探针也是相似的.DNA/转染试剂为1:3时的表达效果最佳;每毫升转染培养基的质粒DNA含量为4或6 μg时,其转染表达可达到最佳;在不同种类的细胞中表达时其差异不明显;在细胞的不同部位表达差异不明显.
利用構建的Rac1、Cdc42單分子探針,探索其在NIH3T3、Hela、COS7等活細胞中的最佳錶達效果.結果錶明在胞漿中錶達的探針其熒光值在誘導5～10 min達到最大值,隨著時間的推移,其熒光彊度逐漸減弱;在細胞膜上錶達的探針也是相似的.DNA/轉染試劑為1:3時的錶達效果最佳;每毫升轉染培養基的質粒DNA含量為4或6 μg時,其轉染錶達可達到最佳;在不同種類的細胞中錶達時其差異不明顯;在細胞的不同部位錶達差異不明顯.
이용구건적Rac1、Cdc42단분자탐침,탐색기재NIH3T3、Hela、COS7등활세포중적최가표체효과.결과표명재포장중표체적탐침기형광치재유도5～10 min체도최대치,수착시간적추이,기형광강도축점감약;재세포막상표체적탐침야시상사적.DNA/전염시제위1:3시적표체효과최가;매호승전염배양기적질립DNA함량위4혹6 μg시,기전염표체가체도최가;재불동충류적세포중표체시기차이불명현;재세포적불동부위표체차이불명현.
