生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2011年
10期
90-96
,共7页
丁广洲%侯静%陈丽%马凤鸣%陈连江
丁廣洲%侯靜%陳麗%馬鳳鳴%陳連江
정엄주%후정%진려%마봉명%진련강
甜研7号%NADH-NR基因%克隆%序列分析
甜研7號%NADH-NR基因%剋隆%序列分析
첨연7호%NADH-NR기인%극륭%서렬분석
利用同源序列克隆方法从标准偏高糖型甜菜品种甜研7号(Ty7)中获得氯素诱导NADH-NR基因片段,通过RACE技术克隆NADH-NR基因全长序列.该基因ORF长度2 718 bp,编码905个氨基酸,包括147 bp的5'UTR和382 bp的3' UTR,GenBank上的注册号为EU163265,基因编码蛋白的等电点为6.12,推测分子量大小为102 kD,C端(778-891 aa)有一个跨膜区域.基因编码多肽含有3个氧化还原功能区:钼辅因子功能区(eukary NR Moco,93 - 478aa),Fe-血红素结合区(Cytb5,535 -608 aa),FAD结合区(FAD binding 6,653 -760 aa).在甜研7号NR下游的氨基酸残基中含有NADH-NR特有的CGPPP-M基序,说明该蛋白以NADH为电子供体.通过比对,甜研7号的NADH-NR基因与菠菜NADH-NR基因同源性最高,为86.18％.经Southem杂变检验,甜研7号中NADH-NR基因以低拷贝数存在.经基因组克隆分析,甜研7号NADH-NR含有3个内含子,4个外显子.
利用同源序列剋隆方法從標準偏高糖型甜菜品種甜研7號(Ty7)中穫得氯素誘導NADH-NR基因片段,通過RACE技術剋隆NADH-NR基因全長序列.該基因ORF長度2 718 bp,編碼905箇氨基痠,包括147 bp的5'UTR和382 bp的3' UTR,GenBank上的註冊號為EU163265,基因編碼蛋白的等電點為6.12,推測分子量大小為102 kD,C耑(778-891 aa)有一箇跨膜區域.基因編碼多肽含有3箇氧化還原功能區:鉬輔因子功能區(eukary NR Moco,93 - 478aa),Fe-血紅素結閤區(Cytb5,535 -608 aa),FAD結閤區(FAD binding 6,653 -760 aa).在甜研7號NR下遊的氨基痠殘基中含有NADH-NR特有的CGPPP-M基序,說明該蛋白以NADH為電子供體.通過比對,甜研7號的NADH-NR基因與菠菜NADH-NR基因同源性最高,為86.18％.經Southem雜變檢驗,甜研7號中NADH-NR基因以低拷貝數存在.經基因組剋隆分析,甜研7號NADH-NR含有3箇內含子,4箇外顯子.
이용동원서렬극륭방법종표준편고당형첨채품충첨연7호(Ty7)중획득록소유도NADH-NR기인편단,통과RACE기술극륭NADH-NR기인전장서렬.해기인ORF장도2 718 bp,편마905개안기산,포괄147 bp적5'UTR화382 bp적3' UTR,GenBank상적주책호위EU163265,기인편마단백적등전점위6.12,추측분자량대소위102 kD,C단(778-891 aa)유일개과막구역.기인편마다태함유3개양화환원공능구:목보인자공능구(eukary NR Moco,93 - 478aa),Fe-혈홍소결합구(Cytb5,535 -608 aa),FAD결합구(FAD binding 6,653 -760 aa).재첨연7호NR하유적안기산잔기중함유NADH-NR특유적CGPPP-M기서,설명해단백이NADH위전자공체.통과비대,첨연7호적NADH-NR기인여파채NADH-NR기인동원성최고,위86.18％.경Southem잡변검험,첨연7호중NADH-NR기인이저고패수존재.경기인조극륭분석,첨연7호NADH-NR함유3개내함자,4개외현자.
