中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2011年
12期
103-106
,共4页
马金柱%宋佰芬%王北艳%曹宁%于立权%崔玉东%朱战波
馬金柱%宋佰芬%王北豔%曹寧%于立權%崔玉東%硃戰波
마금주%송백분%왕북염%조저%우립권%최옥동%주전파
金黄色葡萄球菌%IsdD基因克隆%IsdD蛋白表达
金黃色葡萄毬菌%IsdD基因剋隆%IsdD蛋白錶達
금황색포도구균%IsdD기인극륭%IsdD단백표체
金黄色葡萄球菌是一种重要的人畜致病菌,IsdD属于金黄色葡萄球菌Isd系统中的重要成员.本研究根据GenBank报道的金黄色葡萄球菌IsdD基因序列设计一对特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板扩增出目的片段Is-dD,将其用Nco Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切后连接到载体pET32a(+)上,构建重组质粒pET32a(+)-IsdD.序列分析结果显示,目的基因序列与网上的IsdD序列相比核苷酸序列和氨基酸序列同源性均在98％以上.将鉴定正确的重组质粒转化到大肠杆菌E.coli BL21中并成功诱导表达出大小为61.3 ku的蛋白,这为下一步研究IsdD蛋白的结构和功能奠定了良好基础.
金黃色葡萄毬菌是一種重要的人畜緻病菌,IsdD屬于金黃色葡萄毬菌Isd繫統中的重要成員.本研究根據GenBank報道的金黃色葡萄毬菌IsdD基因序列設計一對特異性引物,以金黃色葡萄毬菌基因組DNA為模闆擴增齣目的片段Is-dD,將其用Nco Ⅰ和Xho Ⅰ雙酶切後連接到載體pET32a(+)上,構建重組質粒pET32a(+)-IsdD.序列分析結果顯示,目的基因序列與網上的IsdD序列相比覈苷痠序列和氨基痠序列同源性均在98％以上.將鑒定正確的重組質粒轉化到大腸桿菌E.coli BL21中併成功誘導錶達齣大小為61.3 ku的蛋白,這為下一步研究IsdD蛋白的結構和功能奠定瞭良好基礎.
금황색포도구균시일충중요적인축치병균,IsdD속우금황색포도구균Isd계통중적중요성원.본연구근거GenBank보도적금황색포도구균IsdD기인서렬설계일대특이성인물,이금황색포도구균기인조DNA위모판확증출목적편단Is-dD,장기용Nco Ⅰ화Xho Ⅰ쌍매절후련접도재체pET32a(+)상,구건중조질립pET32a(+)-IsdD.서렬분석결과현시,목적기인서렬여망상적IsdD서렬상비핵감산서렬화안기산서렬동원성균재98％이상.장감정정학적중조질립전화도대장간균E.coli BL21중병성공유도표체출대소위61.3 ku적단백,저위하일보연구IsdD단백적결구화공능전정료량호기출.
