海洋渔业
海洋漁業
해양어업
MARINE FISHERIES
2012年
1期
76-82
,共7页
草鱼%孕烷X受体%细胞色素P450 3A%草鱼肾细胞系
草魚%孕烷X受體%細胞色素P450 3A%草魚腎細胞繫
초어%잉완X수체%세포색소P450 3A%초어신세포계
根据GenBank中斑马鱼(Danio rerio)和虹鳟(Oncorhynchus mykiss)孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)基因序列设计保守区域简并引物,通过PCR扩增获得草鱼(Ctenopharyngodon idellus)PXR cDNA核苷酸序列片段为509 bp,经推导获取169 aa序列.对草鱼与其它物种PXR氨基酸序列进行同源性比较,用以鉴定其在物种中的进化.应用实时荧光定量PCR( qRT-PCR)检测草鱼9种组织PXR和细胞色素P450 3A(cytochrome P450 3A,CYP3A)基因mRNA相对含量,结果表明,其表达丰度依次为:前肠＞肝脏＞肾脏＞鳃＞肌肉＞后肠＞性腺＞心脏＞脾脏,CYP3A和PXR基因在草鱼组织中表达分布基本一致,在前肠、肝脏和肾脏高度表达,而在其它组织低度表达.为了进一步研究PXR和CYP3A基因表达相关性,通过细胞,特选用诱导剂利福平(rifampicin,RIF),最佳诱导浓度40μM,孵育1、2、4、6、8、10、12、24 h后,用qRT-PCR检测CYP3A-PXR基因动态表达过程.结果显示,诱导组CYP3A和PXR基因表达量均高于对照组,显示出显著诱导效应.
根據GenBank中斑馬魚(Danio rerio)和虹鱒(Oncorhynchus mykiss)孕烷X受體(pregnane X receptor,PXR)基因序列設計保守區域簡併引物,通過PCR擴增穫得草魚(Ctenopharyngodon idellus)PXR cDNA覈苷痠序列片段為509 bp,經推導穫取169 aa序列.對草魚與其它物種PXR氨基痠序列進行同源性比較,用以鑒定其在物種中的進化.應用實時熒光定量PCR( qRT-PCR)檢測草魚9種組織PXR和細胞色素P450 3A(cytochrome P450 3A,CYP3A)基因mRNA相對含量,結果錶明,其錶達豐度依次為:前腸＞肝髒＞腎髒＞鰓＞肌肉＞後腸＞性腺＞心髒＞脾髒,CYP3A和PXR基因在草魚組織中錶達分佈基本一緻,在前腸、肝髒和腎髒高度錶達,而在其它組織低度錶達.為瞭進一步研究PXR和CYP3A基因錶達相關性,通過細胞,特選用誘導劑利福平(rifampicin,RIF),最佳誘導濃度40μM,孵育1、2、4、6、8、10、12、24 h後,用qRT-PCR檢測CYP3A-PXR基因動態錶達過程.結果顯示,誘導組CYP3A和PXR基因錶達量均高于對照組,顯示齣顯著誘導效應.
근거GenBank중반마어(Danio rerio)화홍준(Oncorhynchus mykiss)잉완X수체(pregnane X receptor,PXR)기인서렬설계보수구역간병인물,통과PCR확증획득초어(Ctenopharyngodon idellus)PXR cDNA핵감산서렬편단위509 bp,경추도획취169 aa서렬.대초어여기타물충PXR안기산서렬진행동원성비교,용이감정기재물충중적진화.응용실시형광정량PCR( qRT-PCR)검측초어9충조직PXR화세포색소P450 3A(cytochrome P450 3A,CYP3A)기인mRNA상대함량,결과표명,기표체봉도의차위:전장＞간장＞신장＞새＞기육＞후장＞성선＞심장＞비장,CYP3A화PXR기인재초어조직중표체분포기본일치,재전장、간장화신장고도표체,이재기타조직저도표체.위료진일보연구PXR화CYP3A기인표체상관성,통과세포,특선용유도제리복평(rifampicin,RIF),최가유도농도40μM,부육1、2、4、6、8、10、12、24 h후,용qRT-PCR검측CYP3A-PXR기인동태표체과정.결과현시,유도조CYP3A화PXR기인표체량균고우대조조,현시출현저유도효응.
