武汉大学学报(理学版)
武漢大學學報(理學版)
무한대학학보(이학판)
JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY(Natural Science Edition)
2004年
2期
201-205
,共5页
刘立藏%马辉文%杨频%陈蔚梅%马延高
劉立藏%馬輝文%楊頻%陳蔚梅%馬延高
류립장%마휘문%양빈%진위매%마연고
白细胞介素10%PCR%毕赤酵母%基因表达
白細胞介素10%PCR%畢赤酵母%基因錶達
백세포개소10%PCR%필적효모%기인표체
利用PCR技术从质粒pcDNA3.1/GS扩增得到hIL10基因.将其插入含有AOX1启动子和α分泌信号肽序列的毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K/IL10,转化毕赤酵母GS115,筛选出整合了多拷贝白细胞介素10基因的菌株,经摇瓶培养,0.5%甲醇诱导表达.SDS-PAGE分析显示,表达产物以可溶性分子形式存在于上清中,诱导4 d的表达量达到高峰.Western印迹表明,表达产物具有良好的抗原性和特异性.
利用PCR技術從質粒pcDNA3.1/GS擴增得到hIL10基因.將其插入含有AOX1啟動子和α分泌信號肽序列的畢赤酵母錶達載體pPIC9K中,構建重組質粒pPIC9K/IL10,轉化畢赤酵母GS115,篩選齣整閤瞭多拷貝白細胞介素10基因的菌株,經搖瓶培養,0.5%甲醇誘導錶達.SDS-PAGE分析顯示,錶達產物以可溶性分子形式存在于上清中,誘導4 d的錶達量達到高峰.Western印跡錶明,錶達產物具有良好的抗原性和特異性.
이용PCR기술종질립pcDNA3.1/GS확증득도hIL10기인.장기삽입함유AOX1계동자화α분비신호태서렬적필적효모표체재체pPIC9K중,구건중조질립pPIC9K/IL10,전화필적효모GS115,사선출정합료다고패백세포개소10기인적균주,경요병배양,0.5%갑순유도표체.SDS-PAGE분석현시,표체산물이가용성분자형식존재우상청중,유도4 d적표체량체도고봉.Western인적표명,표체산물구유량호적항원성화특이성.
