中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
1999年
2期
110-115
,共6页
沈昌贤%李钟铎%杨瑞馥%祝庆余
瀋昌賢%李鐘鐸%楊瑞馥%祝慶餘
침창현%리종탁%양서복%축경여
汉坦病毒%基因工程核衣壳蛋白%酶联免疫吸附试验(ELISA)
漢坦病毒%基因工程覈衣殼蛋白%酶聯免疫吸附試驗(ELISA)
한탄병독%기인공정핵의각단백%매련면역흡부시험(ELISA)
根据汉坦病毒H8205株NP基因的序列,设计一对引物,扩增NP前292个氨基酸多肽基因片段,克隆于表达载体pGEX-3X,与载体中26kD的谷胱苷肽巯基转移酶(GST)融合表达.SDS-PAGE显示表达产物(GST-NP)主要以包涵体形式存在.Western-blotting表明此融合蛋白有抗原性.包涵体经分离、洗涤、溶解后,Sepharose 6B层析纯化,用此融合蛋白作抗原,进行ELISA法检测临床HFRS病人标本的IgG和IgM,有很好的特异性和敏感性.有生物活性的汉坦病毒H8205 NP的体外表达成功,为汉坦病毒基因工程抗原的大量制备奠定了基础,也为汉坦病毒的临床检测和流行病学调查提供了一种廉价、安全、可靠的抗原.
根據漢坦病毒H8205株NP基因的序列,設計一對引物,擴增NP前292箇氨基痠多肽基因片段,剋隆于錶達載體pGEX-3X,與載體中26kD的穀胱苷肽巰基轉移酶(GST)融閤錶達.SDS-PAGE顯示錶達產物(GST-NP)主要以包涵體形式存在.Western-blotting錶明此融閤蛋白有抗原性.包涵體經分離、洗滌、溶解後,Sepharose 6B層析純化,用此融閤蛋白作抗原,進行ELISA法檢測臨床HFRS病人標本的IgG和IgM,有很好的特異性和敏感性.有生物活性的漢坦病毒H8205 NP的體外錶達成功,為漢坦病毒基因工程抗原的大量製備奠定瞭基礎,也為漢坦病毒的臨床檢測和流行病學調查提供瞭一種廉價、安全、可靠的抗原.
근거한탄병독H8205주NP기인적서렬,설계일대인물,확증NP전292개안기산다태기인편단,극륭우표체재체pGEX-3X,여재체중26kD적곡광감태구기전이매(GST)융합표체.SDS-PAGE현시표체산물(GST-NP)주요이포함체형식존재.Western-blotting표명차융합단백유항원성.포함체경분리、세조、용해후,Sepharose 6B층석순화,용차융합단백작항원,진행ELISA법검측림상HFRS병인표본적IgG화IgM,유흔호적특이성화민감성.유생물활성적한탄병독H8205 NP적체외표체성공,위한탄병독기인공정항원적대량제비전정료기출,야위한탄병독적림상검측화류행병학조사제공료일충렴개、안전、가고적항원.
