华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2007年
3期
12-15
,共4页
周宏专%徐福洲%王金洛%杨新建%史爱华%杨兵
週宏專%徐福洲%王金洛%楊新建%史愛華%楊兵
주굉전%서복주%왕금락%양신건%사애화%양병
猪繁殖与呼吸综合征病毒%ORF5基因%原核表达%反应原性%跨膜区
豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%ORF5基因%原覈錶達%反應原性%跨膜區
저번식여호흡종합정병독%ORF5기인%원핵표체%반응원성%과막구
为鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)囊膜糖蛋白GP5编码基因ORF5不同编码区的原核表达能力,利用PCR方法分别扩增ORF5基因缺失信号肽的D片段、缺失信号肽和跨膜区的L片段、缺失信号肽的5'端N片段和缺失跨膜区的3'端C片段,经克隆测序后分别插入原核表达载体pET-32a中进行原核表达,结果显示未缺失跨膜区的D片段未见表达产物,而L片段、N片段和C片段分别表达大小约为33,25,29 kDa的融合蛋白.Western blotting检测结果显示L片段表达蛋白可与PRRS阳性血清发生阳性反应,C片段反应性稍弱,而N片段未出现阳性反应,证实ORF5基因编码产物的C端在与抗体结合的反应原性方面具有重要作用.
為鑒定豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)囊膜糖蛋白GP5編碼基因ORF5不同編碼區的原覈錶達能力,利用PCR方法分彆擴增ORF5基因缺失信號肽的D片段、缺失信號肽和跨膜區的L片段、缺失信號肽的5'耑N片段和缺失跨膜區的3'耑C片段,經剋隆測序後分彆插入原覈錶達載體pET-32a中進行原覈錶達,結果顯示未缺失跨膜區的D片段未見錶達產物,而L片段、N片段和C片段分彆錶達大小約為33,25,29 kDa的融閤蛋白.Western blotting檢測結果顯示L片段錶達蛋白可與PRRS暘性血清髮生暘性反應,C片段反應性稍弱,而N片段未齣現暘性反應,證實ORF5基因編碼產物的C耑在與抗體結閤的反應原性方麵具有重要作用.
위감정저번식여호흡종합정병독(PRRSV)낭막당단백GP5편마기인ORF5불동편마구적원핵표체능력,이용PCR방법분별확증ORF5기인결실신호태적D편단、결실신호태화과막구적L편단、결실신호태적5'단N편단화결실과막구적3'단C편단,경극륭측서후분별삽입원핵표체재체pET-32a중진행원핵표체,결과현시미결실과막구적D편단미견표체산물,이L편단、N편단화C편단분별표체대소약위33,25,29 kDa적융합단백.Western blotting검측결과현시L편단표체단백가여PRRS양성혈청발생양성반응,C편단반응성초약,이N편단미출현양성반응,증실ORF5기인편마산물적C단재여항체결합적반응원성방면구유중요작용.
