食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2010年
13期
169-173
,共5页
任晓霞%张昕%崔晓东%李玉英%王转花
任曉霞%張昕%崔曉東%李玉英%王轉花
임효하%장흔%최효동%리옥영%왕전화
苦荞%过敏原%定点突变%免疫活性
苦蕎%過敏原%定點突變%免疫活性
고교%과민원%정점돌변%면역활성
前期研究曾分离获得一种纯度均一的天然苦荞过敏蛋白(tartary buckwheat allergen a,TBa),免疫检测发现其为苦荞中的主要过敏原.本实验采用定点突变的方法对得分较高的表位E1的基因进行分子改造,构建5个突变体L39R、L42R、L47R、V52R、L54R.在大肠杆菌BL21中分别进行表达,经Ni2+-NTA亲和纯化后得到纯度较高的重组突变体蛋白.ELISA和点杂交检测发现,与突变前的E1相比,突变体L42R、L47R、L54R的免疫活性明显降低,这表明Leu42、Leu47、Leu54在TBa的过敏性中起着至关重要的作用.
前期研究曾分離穫得一種純度均一的天然苦蕎過敏蛋白(tartary buckwheat allergen a,TBa),免疫檢測髮現其為苦蕎中的主要過敏原.本實驗採用定點突變的方法對得分較高的錶位E1的基因進行分子改造,構建5箇突變體L39R、L42R、L47R、V52R、L54R.在大腸桿菌BL21中分彆進行錶達,經Ni2+-NTA親和純化後得到純度較高的重組突變體蛋白.ELISA和點雜交檢測髮現,與突變前的E1相比,突變體L42R、L47R、L54R的免疫活性明顯降低,這錶明Leu42、Leu47、Leu54在TBa的過敏性中起著至關重要的作用.
전기연구증분리획득일충순도균일적천연고교과민단백(tartary buckwheat allergen a,TBa),면역검측발현기위고교중적주요과민원.본실험채용정점돌변적방법대득분교고적표위E1적기인진행분자개조,구건5개돌변체L39R、L42R、L47R、V52R、L54R.재대장간균BL21중분별진행표체,경Ni2+-NTA친화순화후득도순도교고적중조돌변체단백.ELISA화점잡교검측발현,여돌변전적E1상비,돌변체L42R、L47R、L54R적면역활성명현강저,저표명Leu42、Leu47、Leu54재TBa적과민성중기착지관중요적작용.
