安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2010年
20期
10543-10546,10574
,共5页
钱丽莹%闫尧%曾利平%徐旭士
錢麗瑩%閆堯%曾利平%徐旭士
전려형%염요%증리평%서욱사
棉铃虫核型多角体病毒%SDS-PAGE%Western blot%缺失
棉鈴蟲覈型多角體病毒%SDS-PAGE%Western blot%缺失
면령충핵형다각체병독%SDS-PAGE%Western blot%결실
[目的]探索棉铃虫核型多角体病毒G4株Ha99蛋白的最佳表达条件.[方法]采用PCR从其基因组中扩增出orf99编码区,将其克隆到pGEM-T easy载体,测序后将其亚克隆到原核表达载体pGEX-KG,转化大肠杆菌BL21加入IPTG诱导融合表达.并在orf99缺失杆粒HaBac△99的基础上构建了orf99敲除子HaBac-KO99及回复子HaBac-Rep99.[结果]SDS-PAGE分析表明,GST-Ha99融合蛋白得到成功表达,Western blot进一步分析表明融合蛋白已得到成功表达.此外,PCR及酶切验证各载体构建成功.[结论]为orf99功能的进一步研究奠定基础.
[目的]探索棉鈴蟲覈型多角體病毒G4株Ha99蛋白的最佳錶達條件.[方法]採用PCR從其基因組中擴增齣orf99編碼區,將其剋隆到pGEM-T easy載體,測序後將其亞剋隆到原覈錶達載體pGEX-KG,轉化大腸桿菌BL21加入IPTG誘導融閤錶達.併在orf99缺失桿粒HaBac△99的基礎上構建瞭orf99敲除子HaBac-KO99及迴複子HaBac-Rep99.[結果]SDS-PAGE分析錶明,GST-Ha99融閤蛋白得到成功錶達,Western blot進一步分析錶明融閤蛋白已得到成功錶達.此外,PCR及酶切驗證各載體構建成功.[結論]為orf99功能的進一步研究奠定基礎.
[목적]탐색면령충핵형다각체병독G4주Ha99단백적최가표체조건.[방법]채용PCR종기기인조중확증출orf99편마구,장기극륭도pGEM-T easy재체,측서후장기아극륭도원핵표체재체pGEX-KG,전화대장간균BL21가입IPTG유도융합표체.병재orf99결실간립HaBac△99적기출상구건료orf99고제자HaBac-KO99급회복자HaBac-Rep99.[결과]SDS-PAGE분석표명,GST-Ha99융합단백득도성공표체,Western blot진일보분석표명융합단백이득도성공표체.차외,PCR급매절험증각재체구건성공.[결론]위orf99공능적진일보연구전정기출.
