湖南师范大学自然科学学报
湖南師範大學自然科學學報
호남사범대학자연과학학보
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NORMALIS HUNANENSIS
2010年
3期
97-102
,共6页
杨新宇%肖佩玲%方亦兵%段华新%周明
楊新宇%肖珮玲%方亦兵%段華新%週明
양신우%초패령%방역병%단화신%주명
IL-21(白细胞介素21)%IL-18(白细胞介素18)%细胞因子诱导的杀伤细胞%脐血
IL-21(白細胞介素21)%IL-18(白細胞介素18)%細胞因子誘導的殺傷細胞%臍血
IL-21(백세포개소21)%IL-18(백세포개소18)%세포인자유도적살상세포%제혈
探讨了IL-21和IL-18对脐血来源CIK细胞增殖和抗肿瘤活性的影响.用淋巴细胞液从新鲜脐血分离单个核细胞,在传统CIK细胞培养基础上采用添加重组人细胞因子IL-21和IL-18的方法体外培养CIK细胞.实验共设4组,A组为对照组:IL-2+anti-CD3mAb+IFN-γ;B组:IL-2+anti-CD3mAb+IFN-γ+IL-21;C组:IL-2+anti-CD3mAb+IFN-γ+IL-18;D组:IL-2+anti-CD3mAb+IFN-γ+IL-21+IL-18.在培养第3、6,9、12、14 d,应用血球计数仪进行细胞计数;在培养第14 d,应用流式细胞术检测各组脐血来源CIK细胞CD3CD56阳性表达;应用酶联免疫吸附试验检测培养上清IFN-γ的浓度;以白血病细胞系K562细胞为靶细胞,用MTT法检测各组CIK细胞对K562细胞的杀伤活性.细胞培养第6 d时,D组细胞数较A组细胞数多,差异有显著性(P<0.05),但其余各组间细胞数无明显差异(各P>0.05).其余各天计数时各组间细胞数无明显差异(各P>0.05).培养第14 d,CD3+CD56+细胞占细胞总数比例在B组、C组和D组均高于对照组(各P<0.01),且CD3+CD56+细胞占细胞总数比例在D组均高于B组和C组(P<O.05),但B组与C组间无统计学差别(P>0.05).B组、C组和D组培养液上清IFN-γ的浓度均明显高于A组培养上清IFN-γ的浓度(各P<0.01),而且D组均高于B组和C组(各P<0.05),且B组高于C组(P<0.05).B组、C组和D组对K562细胞的杀伤活性均高于A组(各P<0.01),而且D组杀伤活性均高于B组和C组(各P<0.05),且B组高于C组(P<0.01).IL-21和IL-18能显著提升CIK细胞培养上清IFN-γ浓度、CD3+CD56+细胞比例和细胞杀伤活性.
探討瞭IL-21和IL-18對臍血來源CIK細胞增殖和抗腫瘤活性的影響.用淋巴細胞液從新鮮臍血分離單箇覈細胞,在傳統CIK細胞培養基礎上採用添加重組人細胞因子IL-21和IL-18的方法體外培養CIK細胞.實驗共設4組,A組為對照組:IL-2+anti-CD3mAb+IFN-γ;B組:IL-2+anti-CD3mAb+IFN-γ+IL-21;C組:IL-2+anti-CD3mAb+IFN-γ+IL-18;D組:IL-2+anti-CD3mAb+IFN-γ+IL-21+IL-18.在培養第3、6,9、12、14 d,應用血毬計數儀進行細胞計數;在培養第14 d,應用流式細胞術檢測各組臍血來源CIK細胞CD3CD56暘性錶達;應用酶聯免疫吸附試驗檢測培養上清IFN-γ的濃度;以白血病細胞繫K562細胞為靶細胞,用MTT法檢測各組CIK細胞對K562細胞的殺傷活性.細胞培養第6 d時,D組細胞數較A組細胞數多,差異有顯著性(P<0.05),但其餘各組間細胞數無明顯差異(各P>0.05).其餘各天計數時各組間細胞數無明顯差異(各P>0.05).培養第14 d,CD3+CD56+細胞佔細胞總數比例在B組、C組和D組均高于對照組(各P<0.01),且CD3+CD56+細胞佔細胞總數比例在D組均高于B組和C組(P<O.05),但B組與C組間無統計學差彆(P>0.05).B組、C組和D組培養液上清IFN-γ的濃度均明顯高于A組培養上清IFN-γ的濃度(各P<0.01),而且D組均高于B組和C組(各P<0.05),且B組高于C組(P<0.05).B組、C組和D組對K562細胞的殺傷活性均高于A組(各P<0.01),而且D組殺傷活性均高于B組和C組(各P<0.05),且B組高于C組(P<0.01).IL-21和IL-18能顯著提升CIK細胞培養上清IFN-γ濃度、CD3+CD56+細胞比例和細胞殺傷活性.
탐토료IL-21화IL-18대제혈래원CIK세포증식화항종류활성적영향.용림파세포액종신선제혈분리단개핵세포,재전통CIK세포배양기출상채용첨가중조인세포인자IL-21화IL-18적방법체외배양CIK세포.실험공설4조,A조위대조조:IL-2+anti-CD3mAb+IFN-γ;B조:IL-2+anti-CD3mAb+IFN-γ+IL-21;C조:IL-2+anti-CD3mAb+IFN-γ+IL-18;D조:IL-2+anti-CD3mAb+IFN-γ+IL-21+IL-18.재배양제3、6,9、12、14 d,응용혈구계수의진행세포계수;재배양제14 d,응용류식세포술검측각조제혈래원CIK세포CD3CD56양성표체;응용매련면역흡부시험검측배양상청IFN-γ적농도;이백혈병세포계K562세포위파세포,용MTT법검측각조CIK세포대K562세포적살상활성.세포배양제6 d시,D조세포수교A조세포수다,차이유현저성(P<0.05),단기여각조간세포수무명현차이(각P>0.05).기여각천계수시각조간세포수무명현차이(각P>0.05).배양제14 d,CD3+CD56+세포점세포총수비례재B조、C조화D조균고우대조조(각P<0.01),차CD3+CD56+세포점세포총수비례재D조균고우B조화C조(P<O.05),단B조여C조간무통계학차별(P>0.05).B조、C조화D조배양액상청IFN-γ적농도균명현고우A조배양상청IFN-γ적농도(각P<0.01),이차D조균고우B조화C조(각P<0.05),차B조고우C조(P<0.05).B조、C조화D조대K562세포적살상활성균고우A조(각P<0.01),이차D조살상활성균고우B조화C조(각P<0.05),차B조고우C조(P<0.01).IL-21화IL-18능현저제승CIK세포배양상청IFN-γ농도、CD3+CD56+세포비례화세포살상활성.