Rv2653c在大肠埃希菌中的克隆与表达研究
Rv2653c재대장애희균중적극륭여표체연구
Clonging and expression of rv2653c gene of M.tuberculosis in E.coli
  • 万方数据
    中国防痨杂志 중국방로잡지
    BULLETIN OF THE CHINESE ANTITUBERCULOSIS ASSOCIATION
    2010年 11期 752-755 ,共4页

    李邦印%孙卫国%程小星%孙昌文%熊志红%王仲元%王金河%苏锐

    리방인%손위국%정소성%손창문%웅지홍%왕중원%왕금하%소예

    分枝杆菌,结核%大肠埃希菌%细菌蛋白质类%重组蛋白质类 分枝桿菌,結覈%大腸埃希菌%細菌蛋白質類%重組蛋白質類
    분지간균,결핵%대장애희균%세균단백질류%중조단백질류
    目的 从H37Rv标准株克隆出结核菌Rv2653c基因并进行表达与初步分析.方法 根据H37Rv基因组序列合成引物,以PCR方法钓取Rv2653c基因,克隆到pGEM-T上,挑取阳性克隆进行测序,将正确编码基因克隆到pET24b载体上,在BL21大肠埃希菌菌株中以IPTG诱导表达重组蛋白.以金属螯合层析初步分离纯化重组蛋白,采用western blot方法对重组抗原进行抗原性初步分析.结果 首先获得了重组的Rv2653c编码的蛋白,表达产率不低于20%,初步纯化纯度约90%,以人血清进行的western blot分析发现,Rv2653c重组蛋白有较好的抗原性.结论 获得了Rv2653c重组蛋白为进一步寻探讨其功能及应用价值奠定基础.
    목적 종H37Rv표준주극륭출결핵균Rv2653c기인병진행표체여초보분석.방법 근거H37Rv기인조서렬합성인물,이PCR방법조취Rv2653c기인,극륭도pGEM-T상,도취양성극륭진행측서,장정학편마기인극륭도pET24b재체상,재BL21대장애희균균주중이IPTG유도표체중조단백.이금속오합층석초보분리순화중조단백,채용western blot방법대중조항원진행항원성초보분석.결과 수선획득료중조적Rv2653c편마적단백,표체산솔불저우20%,초보순화순도약90%,이인혈청진행적western blot분석발현,Rv2653c중조단백유교호적항원성.결론 획득료Rv2653c중조단백위진일보심탐토기공능급응용개치전정기출.
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