食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2010年
23期
151-156
,共6页
高兆建%侯进慧%孙会刚%刁进进
高兆建%侯進慧%孫會剛%刁進進
고조건%후진혜%손회강%조진진
嗜热脂肪芽孢杆菌%β-半乳糖苷酶%分离纯化%性质
嗜熱脂肪芽孢桿菌%β-半乳糖苷酶%分離純化%性質
기열지방아포간균%β-반유당감매%분리순화%성질
为从嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)XG24发酵液中纯化到β-半乳糖苷酶,并对酶学性质进行研究,利用硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和Sephadex G-75分子筛凝胶过滤层析等方法进行分离纯化.结果表明:经过系列步骤纯化后,酶纯度提高了54.5倍,回收率20.4%,酶比活力达32.7U/mg.以邻-硝基酚-D-半乳糖吡喃糖苷(ONPG)为底物,研究β-半乳糖苷酶的酶学性质.最适pH6.5,最适作用温度65℃.此菌株产β-半乳糖苷酶在70℃以下和pH4.0～8.0范围内具有较好的稳定性;Mg2+、Mn2+、Fe2+和Co2+对此酶有明显激活作用,而Cu2+、Ag2+、Hg2+几乎完全抑制酶活性.以ONPG为底物酶的Km值为4.32mmol/L.SDS-PAGE和凝胶过滤层析测得酶蛋白为单肽链蛋白,表观分子质量64kD.因此,嗜热脂肪芽孢杆菌XG24 β-半乳糖苷酶在乳制品工业中具有潜在的应用价值.
為從嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillus stearothermophilus)XG24髮酵液中純化到β-半乳糖苷酶,併對酶學性質進行研究,利用硫痠銨分級鹽析、DEAE-Sepharose Fast Flow陰離子交換層析和Sephadex G-75分子篩凝膠過濾層析等方法進行分離純化.結果錶明:經過繫列步驟純化後,酶純度提高瞭54.5倍,迴收率20.4%,酶比活力達32.7U/mg.以鄰-硝基酚-D-半乳糖吡喃糖苷(ONPG)為底物,研究β-半乳糖苷酶的酶學性質.最適pH6.5,最適作用溫度65℃.此菌株產β-半乳糖苷酶在70℃以下和pH4.0～8.0範圍內具有較好的穩定性;Mg2+、Mn2+、Fe2+和Co2+對此酶有明顯激活作用,而Cu2+、Ag2+、Hg2+幾乎完全抑製酶活性.以ONPG為底物酶的Km值為4.32mmol/L.SDS-PAGE和凝膠過濾層析測得酶蛋白為單肽鏈蛋白,錶觀分子質量64kD.因此,嗜熱脂肪芽孢桿菌XG24 β-半乳糖苷酶在乳製品工業中具有潛在的應用價值.
위종기열지방아포간균(Bacillus stearothermophilus)XG24발효액중순화도β-반유당감매,병대매학성질진행연구,이용류산안분급염석、DEAE-Sepharose Fast Flow음리자교환층석화Sephadex G-75분자사응효과려층석등방법진행분리순화.결과표명:경과계렬보취순화후,매순도제고료54.5배,회수솔20.4%,매비활력체32.7U/mg.이린-초기분-D-반유당필남당감(ONPG)위저물,연구β-반유당감매적매학성질.최괄pH6.5,최괄작용온도65℃.차균주산β-반유당감매재70℃이하화pH4.0～8.0범위내구유교호적은정성;Mg2+、Mn2+、Fe2+화Co2+대차매유명현격활작용,이Cu2+、Ag2+、Hg2+궤호완전억제매활성.이ONPG위저물매적Km치위4.32mmol/L.SDS-PAGE화응효과려층석측득매단백위단태련단백,표관분자질량64kD.인차,기열지방아포간균XG24 β-반유당감매재유제품공업중구유잠재적응용개치.
