中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2011年
8期
1108-1111
,共4页
徐国强%唐佳艳%向敏%王艳%洪阳%胡晓霞%王旭东%陈腾祥
徐國彊%唐佳豔%嚮敏%王豔%洪暘%鬍曉霞%王旭東%陳騰祥
서국강%당가염%향민%왕염%홍양%호효하%왕욱동%진등상
肝癌细胞%钙激活中性蛋白酶-2%阿霉素%周期蛋白E%化疗%耐药性
肝癌細胞%鈣激活中性蛋白酶-2%阿黴素%週期蛋白E%化療%耐藥性
간암세포%개격활중성단백매-2%아매소%주기단백E%화료%내약성
目的 观察阿霉素作用下,钙激活中性蛋白酶-2(calpain-2)在肝癌细胞(HepG2)中的表达及其对细胞存活率的影响,评价其作为抗癌药靶的可能性.方法 以倍比稀释的ADM作用于HepG2细胞,用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)实验检测阿霉素(Adriamycin,ADM)72 h的半数致死量(LD50);用蛋白质印迹(Western blot)检测的ADM(LD50)作用下,calpain-2和cyclin E的表达和酶解情况;给予calpain-2抑制剂(calpastatin peptide)干预后,用MTT法观察ADM对HepG2细胞存活率的影响.结果 MTT实验结果显示,ADM对HepG2的LD50为2.5 μmol·L-1;Western blot发现,随ADM作用时间的延长,calpain-2的表达水平增高(P<0.01),而且被剪切的程度增加(P<0.05);MTT检测ADM对HepG2的作用发现,calpastatin peptide干预的细胞存活率明显低于对照组(P<0.01),Cyclin E 被剪切的程度减轻(P<0.01).结论 肝癌细胞HepG2在ADM作用下发生凋亡的同时,也上调calpain-2的表达水平和活性,并通过其信号通路降低对ADM的敏感性,而针对calpain-2的活性抑制可以提高HepG2对ADM敏感性,提示calpain-2可以作为降低肿瘤化疗耐药性的潜在靶点.
目的 觀察阿黴素作用下,鈣激活中性蛋白酶-2(calpain-2)在肝癌細胞(HepG2)中的錶達及其對細胞存活率的影響,評價其作為抗癌藥靶的可能性.方法 以倍比稀釋的ADM作用于HepG2細胞,用四甲基偶氮唑鹽比色(MTT)實驗檢測阿黴素(Adriamycin,ADM)72 h的半數緻死量(LD50);用蛋白質印跡(Western blot)檢測的ADM(LD50)作用下,calpain-2和cyclin E的錶達和酶解情況;給予calpain-2抑製劑(calpastatin peptide)榦預後,用MTT法觀察ADM對HepG2細胞存活率的影響.結果 MTT實驗結果顯示,ADM對HepG2的LD50為2.5 μmol·L-1;Western blot髮現,隨ADM作用時間的延長,calpain-2的錶達水平增高(P<0.01),而且被剪切的程度增加(P<0.05);MTT檢測ADM對HepG2的作用髮現,calpastatin peptide榦預的細胞存活率明顯低于對照組(P<0.01),Cyclin E 被剪切的程度減輕(P<0.01).結論 肝癌細胞HepG2在ADM作用下髮生凋亡的同時,也上調calpain-2的錶達水平和活性,併通過其信號通路降低對ADM的敏感性,而針對calpain-2的活性抑製可以提高HepG2對ADM敏感性,提示calpain-2可以作為降低腫瘤化療耐藥性的潛在靶點.
목적 관찰아매소작용하,개격활중성단백매-2(calpain-2)재간암세포(HepG2)중적표체급기대세포존활솔적영향,평개기작위항암약파적가능성.방법 이배비희석적ADM작용우HepG2세포,용사갑기우담서염비색(MTT)실험검측아매소(Adriamycin,ADM)72 h적반수치사량(LD50);용단백질인적(Western blot)검측적ADM(LD50)작용하,calpain-2화cyclin E적표체화매해정황;급여calpain-2억제제(calpastatin peptide)간예후,용MTT법관찰ADM대HepG2세포존활솔적영향.결과 MTT실험결과현시,ADM대HepG2적LD50위2.5 μmol·L-1;Western blot발현,수ADM작용시간적연장,calpain-2적표체수평증고(P<0.01),이차피전절적정도증가(P<0.05);MTT검측ADM대HepG2적작용발현,calpastatin peptide간예적세포존활솔명현저우대조조(P<0.01),Cyclin E 피전절적정도감경(P<0.01).결론 간암세포HepG2재ADM작용하발생조망적동시,야상조calpain-2적표체수평화활성,병통과기신호통로강저대ADM적민감성,이침대calpain-2적활성억제가이제고HepG2대ADM민감성,제시calpain-2가이작위강저종류화료내약성적잠재파점.
