北京医学
北京醫學
북경의학
BEIJING MEDICAL JOURNAL
2012年
4期
299-304
,共6页
血管内皮生长因子%上皮-间充质转化%转化生长因子-β1%Smad 2/3
血管內皮生長因子%上皮-間充質轉化%轉化生長因子-β1%Smad 2/3
혈관내피생장인자%상피-간충질전화%전화생장인자-β1%Smad 2/3
目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导HK-2细胞发生肾小管上皮-间充质细胞转化(EMT)的过程中对Smad 2/3,Smad 7信号途径以及SnoN表达的影响.方法 体外培养的HK-2细胞分为:①正常对照组；②TGF-β1(5μgL)阳性对照组；③VEGF165(100μg/L)作用组；④TGF-β1(5 μg/L)+ VEGF165(100 μg/L)共同作用组.采用Western Blot法和RT-PCR分别检测各组细胞p-Smad 2/3和Smad 2/3(共同作用30和60 min),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Smad 7 、SnoN的表达水平(共同作用48 h).结果 TGF-β1组α-SMA蛋白和mRNA表达与正常对照组比较明显增强,TGF-β1与VEGF165共同作用组α-SMA蛋白和mRNA表达与TGF -β1单独作用组比较明显减弱(P＜0.05).体外HK-2细胞,TGF-β1组刺激30、60 min,与正常对照组比较,(p-Smad 2/3)/(Smad 2/3)比值明显升高,TGF-β1 +VEGF165组与TGF-β1单独作用组相比明显下降,且以30 min时下降明显.TGF-β1组作用48h与正常对照组比较,Smad7蛋白和mRNA表达明显下降,VEGF165+TGF-β1组较TGF-β1单独作用组Smad 7表达明显升高(P＜0.05).VEGF165组与正常对照组相比,α-SMA、(p-Smad 2/3 )/(Smad 2/3)、Smad 7蛋白和mRNA表达的差异无统计学意义(P＞0.05).TGF-β1组SnoN蛋白表达与正常对照组比较明显增强(P＜0.05),TGF-β1与VEGF165共同作用组SnoN蛋白表达与TGF-β1单独作用组相比差异无统计学意义(P＞0.05),各组SnoN mRNA表达差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 VEGF165抑制TGF-β1诱导HK-2细胞EMT的机制可能与直接抑制Smad 2/3磷酸化、上调Smad 7信号表达有关,而与调节SnoN表达无关.
目的 探討血管內皮生長因子(VEGF)抑製轉化生長因子-β1(TGF-β1)誘導HK-2細胞髮生腎小管上皮-間充質細胞轉化(EMT)的過程中對Smad 2/3,Smad 7信號途徑以及SnoN錶達的影響.方法 體外培養的HK-2細胞分為:①正常對照組；②TGF-β1(5μgL)暘性對照組；③VEGF165(100μg/L)作用組；④TGF-β1(5 μg/L)+ VEGF165(100 μg/L)共同作用組.採用Western Blot法和RT-PCR分彆檢測各組細胞p-Smad 2/3和Smad 2/3(共同作用30和60 min),α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、Smad 7 、SnoN的錶達水平(共同作用48 h).結果 TGF-β1組α-SMA蛋白和mRNA錶達與正常對照組比較明顯增彊,TGF-β1與VEGF165共同作用組α-SMA蛋白和mRNA錶達與TGF -β1單獨作用組比較明顯減弱(P＜0.05).體外HK-2細胞,TGF-β1組刺激30、60 min,與正常對照組比較,(p-Smad 2/3)/(Smad 2/3)比值明顯升高,TGF-β1 +VEGF165組與TGF-β1單獨作用組相比明顯下降,且以30 min時下降明顯.TGF-β1組作用48h與正常對照組比較,Smad7蛋白和mRNA錶達明顯下降,VEGF165+TGF-β1組較TGF-β1單獨作用組Smad 7錶達明顯升高(P＜0.05).VEGF165組與正常對照組相比,α-SMA、(p-Smad 2/3 )/(Smad 2/3)、Smad 7蛋白和mRNA錶達的差異無統計學意義(P＞0.05).TGF-β1組SnoN蛋白錶達與正常對照組比較明顯增彊(P＜0.05),TGF-β1與VEGF165共同作用組SnoN蛋白錶達與TGF-β1單獨作用組相比差異無統計學意義(P＞0.05),各組SnoN mRNA錶達差異均無統計學意義(P＞0.05).結論 VEGF165抑製TGF-β1誘導HK-2細胞EMT的機製可能與直接抑製Smad 2/3燐痠化、上調Smad 7信號錶達有關,而與調節SnoN錶達無關.
목적 탐토혈관내피생장인자(VEGF)억제전화생장인자-β1(TGF-β1)유도HK-2세포발생신소관상피-간충질세포전화(EMT)적과정중대Smad 2/3,Smad 7신호도경이급SnoN표체적영향.방법 체외배양적HK-2세포분위:①정상대조조；②TGF-β1(5μgL)양성대조조；③VEGF165(100μg/L)작용조；④TGF-β1(5 μg/L)+ VEGF165(100 μg/L)공동작용조.채용Western Blot법화RT-PCR분별검측각조세포p-Smad 2/3화Smad 2/3(공동작용30화60 min),α-평활기기동단백(α-SMA)、Smad 7 、SnoN적표체수평(공동작용48 h).결과 TGF-β1조α-SMA단백화mRNA표체여정상대조조비교명현증강,TGF-β1여VEGF165공동작용조α-SMA단백화mRNA표체여TGF -β1단독작용조비교명현감약(P＜0.05).체외HK-2세포,TGF-β1조자격30、60 min,여정상대조조비교,(p-Smad 2/3)/(Smad 2/3)비치명현승고,TGF-β1 +VEGF165조여TGF-β1단독작용조상비명현하강,차이30 min시하강명현.TGF-β1조작용48h여정상대조조비교,Smad7단백화mRNA표체명현하강,VEGF165+TGF-β1조교TGF-β1단독작용조Smad 7표체명현승고(P＜0.05).VEGF165조여정상대조조상비,α-SMA、(p-Smad 2/3 )/(Smad 2/3)、Smad 7단백화mRNA표체적차이무통계학의의(P＞0.05).TGF-β1조SnoN단백표체여정상대조조비교명현증강(P＜0.05),TGF-β1여VEGF165공동작용조SnoN단백표체여TGF-β1단독작용조상비차이무통계학의의(P＞0.05),각조SnoN mRNA표체차이균무통계학의의(P＞0.05).결론 VEGF165억제TGF-β1유도HK-2세포EMT적궤제가능여직접억제Smad 2/3린산화、상조Smad 7신호표체유관,이여조절SnoN표체무관.
