CAJ | 학술논문

构建的pTO-T7大肠杆菌高效融合表达载体,调控序列中有一个Ω序列和一个T7启动子串联;多克隆位点(MCS)包括8个常用酶切位点;可进行融合表达或者非融合表达,根据不同的需要加以选择;融合蛋白N端为T7g10的12个起始氨基酸,C端为His标签;含kan抗性基因作为选择标记.将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因克隆至pTO-T7载体,在E.coli中的表达结果表明,融合EGFP达到菌体总蛋白量的50%以上,90%以上的融合蛋白以可溶性形式存在,融合后的EGFP仍保持原有的荧光性质.与同时构建的不含Ω序列的pT-T7载体的表达产量的比较研究结果表明,Ω序列在pTo-T7载体中能显著提高表达效率.
구건적pTO-T7대장간균고효융합표체재체,조공서렬중유일개Ω서렬화일개T7계동자천련;다극륭위점(MCS)포괄8개상용매절위점;가진행융합표체혹자비융합표체,근거불동적수요가이선택;융합단백N단위T7g10적12개기시안기산,C단위His표첨;함kan항성기인작위선택표기.장증강형록색형광단백(EGFP)기인극륭지pTO-T7재체,재E.coli중적표체결과표명,융합EGFP체도균체총단백량적50%이상,90%이상적융합단백이가용성형식존재,융합후적EGFP잉보지원유적형광성질.여동시구건적불함Ω서렬적pT-T7재체적표체산량적비교연구결과표명,Ω서렬재pTo-T7재체중능현저제고표체효솔.