安徽医科大学学报
安徽醫科大學學報
안휘의과대학학보
ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
1999年
4期
250-253
,共4页
王明丽%史百芬%李京培%毕克菊%胡勇%黄升海%任斌
王明麗%史百芬%李京培%畢剋菊%鬍勇%黃升海%任斌
왕명려%사백분%리경배%필극국%호용%황승해%임빈
地高辛配基%原位杂交%巨细胞病毒感染%神经元%鼠%大脑皮质
地高辛配基%原位雜交%巨細胞病毒感染%神經元%鼠%大腦皮質
지고신배기%원위잡교%거세포병독감염%신경원%서%대뇌피질
目的建立一种适用于检测人巨细胞病毒(HCMV)感染新生乳鼠大脑皮质神经元原代培养物中病毒DNA的原位杂交法.方法制备和培养新生乳鼠大脑皮质神经元并进行病毒感染;在感染后的第3,5天及第1～4周连续取样用地高辛标记的HCMV即刻早期抗原(MIE)和晚期抗原(LA)寡核苷酸特异性探针分别进行核酸原位杂交,检测受染神经元内相应病毒核酸及分布.结果 MIE寡核苷酸探针可在HCMV感染后第4～7天检出神经元核内HCMV DNA;而LA寡核苷酸探针则可稳定地检出感染后第7～28天细胞培养物中的相应病毒核酸;并显示:HCMV DNA杂交阳性信号在感染的早期主要分布在核内,呈灶性;而在感染的晚期,杂交阳性信号均匀分布于受染神经元的核内及胞浆内.结论地高辛标记的HCMV DNA MIE和LA寡核苷酸探针在病毒感染机制研究以及临床诊断等方面,具有广泛的应用前景.
目的建立一種適用于檢測人巨細胞病毒(HCMV)感染新生乳鼠大腦皮質神經元原代培養物中病毒DNA的原位雜交法.方法製備和培養新生乳鼠大腦皮質神經元併進行病毒感染;在感染後的第3,5天及第1～4週連續取樣用地高辛標記的HCMV即刻早期抗原(MIE)和晚期抗原(LA)寡覈苷痠特異性探針分彆進行覈痠原位雜交,檢測受染神經元內相應病毒覈痠及分佈.結果 MIE寡覈苷痠探針可在HCMV感染後第4～7天檢齣神經元覈內HCMV DNA;而LA寡覈苷痠探針則可穩定地檢齣感染後第7～28天細胞培養物中的相應病毒覈痠;併顯示:HCMV DNA雜交暘性信號在感染的早期主要分佈在覈內,呈竈性;而在感染的晚期,雜交暘性信號均勻分佈于受染神經元的覈內及胞漿內.結論地高辛標記的HCMV DNA MIE和LA寡覈苷痠探針在病毒感染機製研究以及臨床診斷等方麵,具有廣汎的應用前景.
목적건립일충괄용우검측인거세포병독(HCMV)감염신생유서대뇌피질신경원원대배양물중병독DNA적원위잡교법.방법제비화배양신생유서대뇌피질신경원병진행병독감염;재감염후적제3,5천급제1～4주련속취양용지고신표기적HCMV즉각조기항원(MIE)화만기항원(LA)과핵감산특이성탐침분별진행핵산원위잡교,검측수염신경원내상응병독핵산급분포.결과 MIE과핵감산탐침가재HCMV감염후제4～7천검출신경원핵내HCMV DNA;이LA과핵감산탐침칙가은정지검출감염후제7～28천세포배양물중적상응병독핵산;병현시:HCMV DNA잡교양성신호재감염적조기주요분포재핵내,정조성;이재감염적만기,잡교양성신호균균분포우수염신경원적핵내급포장내.결론지고신표기적HCMV DNA MIE화LA과핵감산탐침재병독감염궤제연구이급림상진단등방면,구유엄범적응용전경.
