中华整形外科杂志
中華整形外科雜誌
중화정형외과잡지
CHINESE JOURNAL OF PLASTIC SURGERY
2006年
2期
109-112
,共4页
唐世杰%谢思田%胡素銮%肖志强%申纪奎%易红
唐世傑%謝思田%鬍素鑾%肖誌彊%申紀奎%易紅
당세걸%사사전%호소란%초지강%신기규%역홍
转化生长因子β3%基因转染%稳定表达系统%成纤维细胞
轉化生長因子β3%基因轉染%穩定錶達繫統%成纖維細胞
전화생장인자β3%기인전염%은정표체계통%성섬유세포
目的构建人转化生长因子β3的真核表达载体pcDNA3.1(-)/TGFβ3转染NIH3T3成纤维细胞的稳定表达系统,研究转基因TGFβ3对成纤维细胞生长增殖活性的影响.方法通过脂质体介导的转染技术和G418细胞筛选法,将真核表达载体pcDNA3.1(-)/TGFβ3质粒导入NIH3T3成纤维细胞,应用RT-PCR与Western blot检测hTGβ3在真核细胞中的表达.经相差显微镜形态观察及四唑蓝比色实验法(MTT)检测细胞增殖活性.结果在10株转染和经G418反复筛选的NIH3T3成纤维细胞系中,有7株hTGFβ3 mRNA及其蛋白的表达明显增强,其余3株细胞相对较弱或者没有表达.TGFβ3转基因稳定表达的NIH3T3成纤维细胞系的生长增殖明显减缓(P＜0.05).结论pcDNA3.1(-)/TGFβ3真核表达载体转染NIH3T3成纤维细胞的稳定表达系统构建成功,转基因hTGFβ3在体外培养条件下可抑制成纤维细胞的增殖.
目的構建人轉化生長因子β3的真覈錶達載體pcDNA3.1(-)/TGFβ3轉染NIH3T3成纖維細胞的穩定錶達繫統,研究轉基因TGFβ3對成纖維細胞生長增殖活性的影響.方法通過脂質體介導的轉染技術和G418細胞篩選法,將真覈錶達載體pcDNA3.1(-)/TGFβ3質粒導入NIH3T3成纖維細胞,應用RT-PCR與Western blot檢測hTGβ3在真覈細胞中的錶達.經相差顯微鏡形態觀察及四唑藍比色實驗法(MTT)檢測細胞增殖活性.結果在10株轉染和經G418反複篩選的NIH3T3成纖維細胞繫中,有7株hTGFβ3 mRNA及其蛋白的錶達明顯增彊,其餘3株細胞相對較弱或者沒有錶達.TGFβ3轉基因穩定錶達的NIH3T3成纖維細胞繫的生長增殖明顯減緩(P＜0.05).結論pcDNA3.1(-)/TGFβ3真覈錶達載體轉染NIH3T3成纖維細胞的穩定錶達繫統構建成功,轉基因hTGFβ3在體外培養條件下可抑製成纖維細胞的增殖.
목적구건인전화생장인자β3적진핵표체재체pcDNA3.1(-)/TGFβ3전염NIH3T3성섬유세포적은정표체계통,연구전기인TGFβ3대성섬유세포생장증식활성적영향.방법통과지질체개도적전염기술화G418세포사선법,장진핵표체재체pcDNA3.1(-)/TGFβ3질립도입NIH3T3성섬유세포,응용RT-PCR여Western blot검측hTGβ3재진핵세포중적표체.경상차현미경형태관찰급사서람비색실험법(MTT)검측세포증식활성.결과재10주전염화경G418반복사선적NIH3T3성섬유세포계중,유7주hTGFβ3 mRNA급기단백적표체명현증강,기여3주세포상대교약혹자몰유표체.TGFβ3전기인은정표체적NIH3T3성섬유세포계적생장증식명현감완(P＜0.05).결론pcDNA3.1(-)/TGFβ3진핵표체재체전염NIH3T3성섬유세포적은정표체계통구건성공,전기인hTGFβ3재체외배양조건하가억제성섬유세포적증식.
