CAJ | 학술논문

目的利用人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,探讨survivin基因诱导肝癌细胞凋亡的相关信号转导途径.方法采用脂质体介导survivin反义寡核苷酸转染人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,采用Western印迹及原位杂交检测细胞内survivin蛋白及mRNA的表达,采用流式细胞仪及TUNEL染色检测细胞凋亡的变化,采用western印迹、免疫沉淀、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及激酶活性检测方法测定细胞内丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)及半胱氨蛋白水解酶3表达及活性的变化,观察p38MAPK与半胱氨蛋白水解酶3活性变化之间的关系.结果脂质体介导转染survivin反义寡核苷酸后,SMMC-7721肝癌细胞内survivin蛋白及mRNA表达可分别被下调84.6%及69.7%,凋亡细胞比率由转染前的0.70%增加至31.15%.转染后细胞内p38MAPK及半胱氨蛋白水解酶3表达无明显变化,但其活性显著升高,其中p38MAPK活性升高发生于半胱氨蛋白水解酶3活性升高之前.结论转染survivin反义寡核苷酸可以有效诱导肝癌细胞发生凋亡,其诱导肝癌细胞凋亡的信号通过顺序激活p38MAPK-半胱氨蛋白水解酶3信号途径传导.
목적이용인간암세포주SMMC-7721세포,탐토survivin기인유도간암세포조망적상관신호전도도경.방법채용지질체개도survivin반의과핵감산전염인간암세포주SMMC-7721세포,채용Western인적급원위잡교검측세포내survivin단백급mRNA적표체,채용류식세포의급TUNEL염색검측세포조망적변화,채용western인적、면역침정、역전록-취합매련반응(RT-PCR)급격매활성검측방법측정세포내사렬원활화단백격매p38(p38MAPK)급반광안단백수해매3표체급활성적변화,관찰p38MAPK여반광안단백수해매3활성변화지간적관계.결과지질체개도전염survivin반의과핵감산후,SMMC-7721간암세포내survivin단백급mRNA표체가분별피하조84.6%급69.7%,조망세포비솔유전염전적0.70%증가지31.15%.전염후세포내p38MAPK급반광안단백수해매3표체무명현변화,단기활성현저승고,기중p38MAPK활성승고발생우반광안단백수해매3활성승고지전.결론전염survivin반의과핵감산가이유효유도간암세포발생조망,기유도간암세포조망적신호통과순서격활p38MAPK-반광안단백수해매3신호도경전도.