CAJ | 학술논문

目的研究重组人乳头瘤病毒6型(human papillomavirus type 6, HPV-6)病毒样颗粒(virus-like particle, VLP)的免疫原性. 方法重组杆状病毒在昆虫细胞中表达制备的HPV-6 L1 VLP(L1-VLP)和HPV-6 L1+L2 VLP(L1+2-VLP)经鉴定后,用于免疫BALB/c小鼠,对诱导的体液免疫和细胞免疫反应进行了检测. 结果电镜观察显示L1-VLP和L1+2-VLP二者形态上无明显差异,为圆形颗粒,直径约50nm,SDS-PAGE和Western blot分析表明,L1+2-VLP中L1和L2蛋白摩尔比例为4∶1.用ELISA法测定免疫小鼠血清抗体滴度,加佐剂L1-VLP免疫组和加佐剂L1+2-VLP免疫组血清针对HPV-6 L1 VLP的滴度在1∶10000以上,高于未加佐剂组免疫血清滴度(1∶2000),L1+2-VLP免疫诱导出了特异于L2抗原的抗体.血清抗体主要识别HPV-6构象依赖性抗原表位,与HPV-11抗原显示出一定的交叉反应,而与HPV-16无明显交叉反应.免疫小鼠脾淋巴细胞体外经HPV-6 L1 VLP再激活后出现了特异性增殖反应,3H-TdR掺入值与未免疫组之间差异有显著性(P＜0.01),L1-VLP和L1+2-VLP两组间差异无显著性(P＞0.05),L1-VLP和L1+2-VLP免疫组刺激指数(SI)分别为6.4和6.2,阴性对照组SI为1.1.HPV-6 L1 VLP再刺激特异地诱导免疫组脾淋巴细胞IL-2和IL-10分泌显著增加,与未免疫组之间差异有显著性(P＜0.01),但未检测到IFN-γ分泌的明显增加. 结论制备的HPV-6 VLP具有良好的免疫原性,在免疫小鼠体内同时诱导了细胞免疫和体液免疫反应,可以用于研制HPV预防性疫苗.
목적연구중조인유두류병독6형(human papillomavirus type 6, HPV-6)병독양과립(virus-like particle, VLP)적면역원성. 방법중조간상병독재곤충세포중표체제비적HPV-6 L1 VLP(L1-VLP)화HPV-6 L1+L2 VLP(L1+2-VLP)경감정후,용우면역BALB/c소서,대유도적체액면역화세포면역반응진행료검측. 결과전경관찰현시L1-VLP화L1+2-VLP이자형태상무명현차이,위원형과립,직경약50nm,SDS-PAGE화Western blot분석표명,L1+2-VLP중L1화L2단백마이비례위4∶1.용ELISA법측정면역소서혈청항체적도,가좌제L1-VLP면역조화가좌제L1+2-VLP면역조혈청침대HPV-6 L1 VLP적적도재1∶10000이상,고우미가좌제조면역혈청적도(1∶2000),L1+2-VLP면역유도출료특이우L2항원적항체.혈청항체주요식별HPV-6구상의뢰성항원표위,여HPV-11항원현시출일정적교차반응,이여HPV-16무명현교차반응.면역소서비림파세포체외경HPV-6 L1 VLP재격활후출현료특이성증식반응,3H-TdR참입치여미면역조지간차이유현저성(P＜0.01),L1-VLP화L1+2-VLP량조간차이무현저성(P＞0.05),L1-VLP화L1+2-VLP면역조자격지수(SI)분별위6.4화6.2,음성대조조SI위1.1.HPV-6 L1 VLP재자격특이지유도면역조비림파세포IL-2화IL-10분비현저증가,여미면역조지간차이유현저성(P＜0.01),단미검측도IFN-γ분비적명현증가. 결론제비적HPV-6 VLP구유량호적면역원성,재면역소서체내동시유도료세포면역화체액면역반응,가이용우연제HPV예방성역묘.