CAJ | 학술논문

目的探讨白细胞介素I受体拮抗剂(IL-1ra)基因治疗小鼠Ⅱ型胶原关节炎效果,为临床开展类风湿关节炎基因治疗奠定基础.方法通过基因工程方法将人IL-1ra cDNA插入真核表达载体pcDI中,构建成在真核细胞内表达IL-1ra的质粒pcDI- IL-1ra.经酶切、PCR和DNA测序鉴定均证实了插入片段的正确性.体外和体内转染真核细胞后,分别用ELISA和免疫组织化学方法检测到了IL-1ra的高效表达.将小鼠分成4组,每组8只,1组、2组用基因枪给药法(20 μg/只小鼠),3组、4组用肌肉注射法(200 μg/只小鼠),一次性将这一构建质粒注射于Ⅱ型胶原诱导的DBA/1小鼠关节炎模型肌肉组织中.结果用两种方式IL-1ra基因给药后第4天,小鼠肌肉组织中IL-1ra表达结果经计算机图像分析,吸光度(A)490值:基因枪组为0.52±0.03,肌注组为0.48±0.02,对照组0.41±0.02.基因枪组与于对照组比较P<0.01,肌注组与对照组比较P<0.05.给药后第6天和第12天,小鼠血清IL-1ra水平,与对照组比较基因枪组于第6天和第12天均显著升高(P<0.01).肌注组小鼠血清IL-1ra水平在第6天和第12天也显著高于对照组(P<0.01,P<0.05).两种治疗组的小鼠病情从第6天开始缓解,关节红肿较对照组减轻.第12天小鼠关节组织病理表明,关节部位炎性细胞浸润、滑膜增生、软骨破坏及骨浸润等均有不同程度的缓解.基因枪给药组较肌肉注射组小鼠病情改善明显.结论通过非病毒性真核表达载体进行IL-1ra基因给药,在Ⅱ型胶原诱导的DBA/1小鼠关节炎模型治疗中获得明显效果,基因枪给药疗效更为显著.
목적탐토백세포개소I수체길항제(IL-1ra)기인치료소서Ⅱ형효원관절염효과,위림상개전류풍습관절염기인치료전정기출.방법통과기인공정방법장인IL-1ra cDNA삽입진핵표체재체pcDI중,구건성재진핵세포내표체IL-1ra적질립pcDI- IL-1ra.경매절、PCR화DNA측서감정균증실료삽입편단적정학성.체외화체내전염진핵세포후,분별용ELISA화면역조직화학방법검측도료IL-1ra적고효표체.장소서분성4조,매조8지,1조、2조용기인창급약법(20 μg/지소서),3조、4조용기육주사법(200 μg/지소서),일차성장저일구건질립주사우Ⅱ형효원유도적DBA/1소서관절염모형기육조직중.결과용량충방식IL-1ra기인급약후제4천,소서기육조직중IL-1ra표체결과경계산궤도상분석,흡광도(A)490치:기인창조위0.52±0.03,기주조위0.48±0.02,대조조0.41±0.02.기인창조여우대조조비교P<0.01,기주조여대조조비교P<0.05.급약후제6천화제12천,소서혈청IL-1ra수평,여대조조비교기인창조우제6천화제12천균현저승고(P<0.01).기주조소서혈청IL-1ra수평재제6천화제12천야현저고우대조조(P<0.01,P<0.05).량충치료조적소서병정종제6천개시완해,관절홍종교대조조감경.제12천소서관절조직병리표명,관절부위염성세포침윤、활막증생、연골파배급골침윤등균유불동정도적완해.기인창급약조교기육주사조소서병정개선명현.결론통과비병독성진핵표체재체진행IL-1ra기인급약,재Ⅱ형효원유도적DBA/1소서관절염모형치료중획득명현효과,기인창급약료효경위현저.