中华实验和临床病毒学杂志
中華實驗和臨床病毒學雜誌
중화실험화림상병독학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL AND CLINICAL VIROLOGY
2002年
1期
40-43
,共4页
董京芳%蒋郁青%王健伟%解燕乡%杭长寿%洪涛
董京芳%蔣鬱青%王健偉%解燕鄉%杭長壽%洪濤
동경방%장욱청%왕건위%해연향%항장수%홍도
整合素类%汉坦病毒%基因表达%受体,病毒
整閤素類%漢坦病毒%基因錶達%受體,病毒
정합소류%한탄병독%기인표체%수체,병독
目的克隆表达β3-整合素基因,制备抗体,并用之进行β3-整合素表达阴性Vero细胞的分离和富集.方法采用RT-PCR扩增克隆β3-整合素基因,亚克隆至pQE30表达质粒,在原核细胞中表达,免疫印迹实验确证其表达及免疫反应性.纯化蛋白免疫接种家兔制备抗体,补体介导的抗体依赖性的细胞毒实验分离富集目的细胞,免疫荧光及免疫印迹检测筛选结果.结果成功克隆β3-整合素基因,并在pQE30表达系统中得到高效表达.免疫印迹证实所表达的β3-整合素蛋白具有良好的免疫反应性.制备了高效抗体,免疫荧光及免疫印迹均未检测出β3-整合素在Vero、VeroE6、Hep-2,2BS和293等汉坦病毒敏感细胞表面的表达.结论除β3-整合素外,汉坦病毒很可能还有别的受体.
目的剋隆錶達β3-整閤素基因,製備抗體,併用之進行β3-整閤素錶達陰性Vero細胞的分離和富集.方法採用RT-PCR擴增剋隆β3-整閤素基因,亞剋隆至pQE30錶達質粒,在原覈細胞中錶達,免疫印跡實驗確證其錶達及免疫反應性.純化蛋白免疫接種傢兔製備抗體,補體介導的抗體依賴性的細胞毒實驗分離富集目的細胞,免疫熒光及免疫印跡檢測篩選結果.結果成功剋隆β3-整閤素基因,併在pQE30錶達繫統中得到高效錶達.免疫印跡證實所錶達的β3-整閤素蛋白具有良好的免疫反應性.製備瞭高效抗體,免疫熒光及免疫印跡均未檢測齣β3-整閤素在Vero、VeroE6、Hep-2,2BS和293等漢坦病毒敏感細胞錶麵的錶達.結論除β3-整閤素外,漢坦病毒很可能還有彆的受體.
목적극륭표체β3-정합소기인,제비항체,병용지진행β3-정합소표체음성Vero세포적분리화부집.방법채용RT-PCR확증극륭β3-정합소기인,아극륭지pQE30표체질립,재원핵세포중표체,면역인적실험학증기표체급면역반응성.순화단백면역접충가토제비항체,보체개도적항체의뢰성적세포독실험분리부집목적세포,면역형광급면역인적검측사선결과.결과성공극륭β3-정합소기인,병재pQE30표체계통중득도고효표체.면역인적증실소표체적β3-정합소단백구유량호적면역반응성.제비료고효항체,면역형광급면역인적균미검측출β3-정합소재Vero、VeroE6、Hep-2,2BS화293등한탄병독민감세포표면적표체.결론제β3-정합소외,한탄병독흔가능환유별적수체.
