CAJ | 학술논문

目的探讨外源hTERT基因转染对大鼠供肝冷缺血再灌注损伤的防护作用.方法将表达hTERT蛋白的重组腺病毒rAd-hTERT转染试验组大鼠,同时设空载体对照组及空白对照组.组1(n=25)大鼠供体取肝前48 h前阴茎背静脉目的基因干预实验组;组2(n=25)空载体病毒干预实验组;组3(n=25)注射等体积生理盐水;供肝切取置于UW液中修整保存6 h后移植给同种大鼠.移植后3,6,12,24,48 h分别取材进行相关检测,检测各组血清内ALT水平,端粒酶活性的测定,普通光镜和电镜下观察组织学变化,TUNEL法检测细胞凋亡.结果 hTERT预处理组术后3,6,12,24,48 h血清ALT较生理盐水组明显降低(P＜0.05),而空载体组和生理盐水组之间无差异;hTERT预处理可以显著提高供肝的端粒酶的活性,24 h达到空载体对照组的(177.03±7.24)%(P＜0.05);和hTERT组相比较,其他两组移植肝均表现出严重的小梁结构的破坏,门静脉周围的水肿以及空泡样变性.电镜检测也发现生理盐水组、空载体组的肝细胞内有大量的空泡,线粒体严重肿胀的现象;和生理盐水组及空载体组相比较,hTERT组的TUNEL阳性细胞明显减少,其凋亡指数和其他两组相比亦明显减少(P＜0.05).结论腺病毒载体可成功介导hTERT基因对大鼠移植肝的转染;hTERT基因转染预处理能够减轻冷缺血再灌注损伤,hTERT的作用主要是通过上调端粒酶活性而抑制细胞凋亡来实现的.
목적 탐토외원hTERT기인전염대대서공간랭결혈재관주손상적방호작용.방법 장표체hTERT단백적중조선병독rAd-hTERT전염시험조대서,동시설공재체대조조급공백대조조.조1(n=25)대서공체취간전48 h전음경배정맥목적기인간예실험조;조2(n=25)공재체병독간예실험조;조3(n=25)주사등체적생리염수;공간절취치우UW액중수정보존6 h후이식급동충대서.이식후3,6,12,24,48 h분별취재진행상관검측,검측각조혈청내ALT수평,단립매활성적측정,보통광경화전경하관찰조직학변화,TUNEL법검측세포조망.결과 hTERT예처리조술후3,6,12,24,48 h혈청ALT교생리염수조명현강저(P＜0.05),이공재체조화생리염수조지간무차이;hTERT예처리가이현저제고공간적단립매적활성,24 h체도공재체대조조적(177.03±7.24)%(P＜0.05);화hTERT조상비교,기타량조이식간균표현출엄중적소량결구적파배,문정맥주위적수종이급공포양변성.전경검측야발현생리염수조、공재체조적간세포내유대량적공포,선립체엄중종창적현상;화생리염수조급공재체조상비교,hTERT조적TUNEL양성세포명현감소,기조망지수화기타량조상비역명현감소(P＜0.05).결론 선병독재체가성공개도hTERT기인대대서이식간적전염;hTERT기인전염예처리능구감경랭결혈재관주손상,hTERT적작용주요시통과상조단립매활성이억제세포조망래실현적.