中国饲料
中國飼料
중국사료
CHINA FEED
2012年
9期
11-14,18
,共5页
谢万华%陈仙菊%姚朝刚%韩阳%逄大欣%唐晓春
謝萬華%陳仙菊%姚朝剛%韓暘%逄大訢%唐曉春
사만화%진선국%요조강%한양%방대흔%당효춘
单胚胎RT-qPCR%猪体细胞核移植%全能性基因%基因表达
單胚胎RT-qPCR%豬體細胞覈移植%全能性基因%基因錶達
단배태RT-qPCR%저체세포핵이식%전능성기인%기인표체
为了检测猪体细胞核移植囊胚的质量和全能性基因表达量,采用体细胞核移植技术制备克隆胚胎并于体外培养5d后获得囊胚,对照组为从人工授精5d后的长白母猪体内获取的体内囊胚.在高倍镜下检测两组囊胚的形态,用Hoechest 33342染色细胞核DNA,记录囊胚细胞总数；建立单胚胎cDNA的制备方法,并用qPCR检测囊胚中全能性基因(Oct4、Nanog、Sox2)的表达量.结果表明,与体内囊胚相比,猪体细胞核移植囊胚质量较差,细胞数目显著降低(分别为110±10.3和54±12.6)；并且全能性基因表达量显著下降(P＜0.05).由此可见,全能性基因表达量偏低是影响猪体细胞核移植囊胚发育能力的因素之一.
為瞭檢測豬體細胞覈移植囊胚的質量和全能性基因錶達量,採用體細胞覈移植技術製備剋隆胚胎併于體外培養5d後穫得囊胚,對照組為從人工授精5d後的長白母豬體內穫取的體內囊胚.在高倍鏡下檢測兩組囊胚的形態,用Hoechest 33342染色細胞覈DNA,記錄囊胚細胞總數；建立單胚胎cDNA的製備方法,併用qPCR檢測囊胚中全能性基因(Oct4、Nanog、Sox2)的錶達量.結果錶明,與體內囊胚相比,豬體細胞覈移植囊胚質量較差,細胞數目顯著降低(分彆為110±10.3和54±12.6)；併且全能性基因錶達量顯著下降(P＜0.05).由此可見,全能性基因錶達量偏低是影響豬體細胞覈移植囊胚髮育能力的因素之一.
위료검측저체세포핵이식낭배적질량화전능성기인표체량,채용체세포핵이식기술제비극륭배태병우체외배양5d후획득낭배,대조조위종인공수정5d후적장백모저체내획취적체내낭배.재고배경하검측량조낭배적형태,용Hoechest 33342염색세포핵DNA,기록낭배세포총수；건립단배태cDNA적제비방법,병용qPCR검측낭배중전능성기인(Oct4、Nanog、Sox2)적표체량.결과표명,여체내낭배상비,저체세포핵이식낭배질량교차,세포수목현저강저(분별위110±10.3화54±12.6)；병차전능성기인표체량현저하강(P＜0.05).유차가견,전능성기인표체량편저시영향저체세포핵이식낭배발육능력적인소지일.
