南京农业大学学报
南京農業大學學報
남경농업대학학보
JOURNAL OF NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
4期
75-80
,共6页
胡黎明%申建梅%宾淑英%廖泓之%林进添
鬍黎明%申建梅%賓淑英%廖泓之%林進添
호려명%신건매%빈숙영%료홍지%림진첨
桔小实蝇%Takeout蛋白%基因克隆%荧光定量PCR
桔小實蠅%Takeout蛋白%基因剋隆%熒光定量PCR
길소실승%Takeout단백%기인극륭%형광정량PCR
采用RT-PCR及RACE技术克隆了桔小实蝇(Bactrocera dorsalis(Hendel))takeout基因的cDNA全长序列,命名为BdorTO.测序结果表明:BdorTO开放阅读框全长747bp,编码248个氨基酸,相对分子质量约为28.15×103,等电点为5.29.SignalP软件分析表明,该蛋白N端具21个氨基酸的信号肽,为分泌型蛋白.氨基酸序列比对表明,BdorTO蛋白与其他昆虫TO蛋白的序列一致性较低,其中与刺舌蝇(Glassina moraitans)的序列一致性最高,一致性值为48.6%.荧光定量PCR分析表明,BdorTO在触角中的表达量最高,推测BdorTO可能参与了桔小实蝇嗅觉感受过程;在雄虫生殖节中的表达量明显高于雌虫生殖节,提示BdorTO可能与桔小实蝇雄虫的生殖生理过程密切相关.
採用RT-PCR及RACE技術剋隆瞭桔小實蠅(Bactrocera dorsalis(Hendel))takeout基因的cDNA全長序列,命名為BdorTO.測序結果錶明:BdorTO開放閱讀框全長747bp,編碼248箇氨基痠,相對分子質量約為28.15×103,等電點為5.29.SignalP軟件分析錶明,該蛋白N耑具21箇氨基痠的信號肽,為分泌型蛋白.氨基痠序列比對錶明,BdorTO蛋白與其他昆蟲TO蛋白的序列一緻性較低,其中與刺舌蠅(Glassina moraitans)的序列一緻性最高,一緻性值為48.6%.熒光定量PCR分析錶明,BdorTO在觸角中的錶達量最高,推測BdorTO可能參與瞭桔小實蠅嗅覺感受過程;在雄蟲生殖節中的錶達量明顯高于雌蟲生殖節,提示BdorTO可能與桔小實蠅雄蟲的生殖生理過程密切相關.
채용RT-PCR급RACE기술극륭료길소실승(Bactrocera dorsalis(Hendel))takeout기인적cDNA전장서렬,명명위BdorTO.측서결과표명:BdorTO개방열독광전장747bp,편마248개안기산,상대분자질량약위28.15×103,등전점위5.29.SignalP연건분석표명,해단백N단구21개안기산적신호태,위분비형단백.안기산서렬비대표명,BdorTO단백여기타곤충TO단백적서렬일치성교저,기중여자설승(Glassina moraitans)적서렬일치성최고,일치성치위48.6%.형광정량PCR분석표명,BdorTO재촉각중적표체량최고,추측BdorTO가능삼여료길소실승후각감수과정;재웅충생식절중적표체량명현고우자충생식절,제시BdorTO가능여길소실승웅충적생식생리과정밀절상관.