分子诊断与治疗杂志
分子診斷與治療雜誌
분자진단여치료잡지
JOURNAL OF MOLECULAR DIAGNOSIS AND THERAPY
2012年
3期
158-162
,共5页
罗雅艳%冯俊杰%方丹云%江丽芳
囉雅豔%馮俊傑%方丹雲%江麗芳
라아염%풍준걸%방단운%강려방
登革病毒%TaqMan MGB%实时定量RT-PCR%检测
登革病毒%TaqMan MGB%實時定量RT-PCR%檢測
등혁병독%TaqMan MGB%실시정량RT-PCR%검측
目的 建立登革病毒TaqMan实时荧光定量PCR快速检测方法及应用于临床.方法 根据1～4型登革病毒3’端非编码区的一段高度保守序列,设计一套型通用的引物和TaqMan MGB探针,以4个血清型登革病毒标准株为标准,以日本乙脑病毒和丙肝病毒作阴性对照,以包含登革病毒2型标准株(DENV-2 NGC株)3’非编码区349 bp片段的质粒DNA作标准品,对引物和TaqMan MGB探针的特异性、灵敏度进行分析,从而建立登革病毒实时荧光定量PCR检测方法.用该法对登革病毒野毒株和10份登革病毒患者血清进行检测.结果 TaqMan实时荧光定量PCR检测的1～4型登革病毒标准株及野毒株均为阳性,日本乙脑病毒和丙肝病毒均为阴性；检测灵敏度可达到每反应2个基因拷贝；检测的10份登革患者血清样本中,8份检测结果为阳性.结论 TaqMan MGB实时荧光定量PCR方法是一个快速、特异性强、敏感性高的检测登革病毒的方法,适用于登革病毒的临床早期诊断.
目的 建立登革病毒TaqMan實時熒光定量PCR快速檢測方法及應用于臨床.方法 根據1～4型登革病毒3’耑非編碼區的一段高度保守序列,設計一套型通用的引物和TaqMan MGB探針,以4箇血清型登革病毒標準株為標準,以日本乙腦病毒和丙肝病毒作陰性對照,以包含登革病毒2型標準株(DENV-2 NGC株)3’非編碼區349 bp片段的質粒DNA作標準品,對引物和TaqMan MGB探針的特異性、靈敏度進行分析,從而建立登革病毒實時熒光定量PCR檢測方法.用該法對登革病毒野毒株和10份登革病毒患者血清進行檢測.結果 TaqMan實時熒光定量PCR檢測的1～4型登革病毒標準株及野毒株均為暘性,日本乙腦病毒和丙肝病毒均為陰性；檢測靈敏度可達到每反應2箇基因拷貝；檢測的10份登革患者血清樣本中,8份檢測結果為暘性.結論 TaqMan MGB實時熒光定量PCR方法是一箇快速、特異性彊、敏感性高的檢測登革病毒的方法,適用于登革病毒的臨床早期診斷.
목적 건립등혁병독TaqMan실시형광정량PCR쾌속검측방법급응용우림상.방법 근거1～4형등혁병독3’단비편마구적일단고도보수서렬,설계일투형통용적인물화TaqMan MGB탐침,이4개혈청형등혁병독표준주위표준,이일본을뇌병독화병간병독작음성대조,이포함등혁병독2형표준주(DENV-2 NGC주)3’비편마구349 bp편단적질립DNA작표준품,대인물화TaqMan MGB탐침적특이성、령민도진행분석,종이건립등혁병독실시형광정량PCR검측방법.용해법대등혁병독야독주화10빈등혁병독환자혈청진행검측.결과 TaqMan실시형광정량PCR검측적1～4형등혁병독표준주급야독주균위양성,일본을뇌병독화병간병독균위음성；검측령민도가체도매반응2개기인고패；검측적10빈등혁환자혈청양본중,8빈검측결과위양성.결론 TaqMan MGB실시형광정량PCR방법시일개쾌속、특이성강、민감성고적검측등혁병독적방법,괄용우등혁병독적림상조기진단.
