福建果树
福建果樹
복건과수
FUJIAN FRUITS
2011年
4期
1-4
,共4页
谢丽雪%张小艳%张立杰%郑姗%李韬
謝麗雪%張小豔%張立傑%鄭姍%李韜
사려설%장소염%장립걸%정산%리도
枇杷%正交试验%SSR%反应体系
枇杷%正交試驗%SSR%反應體繫
비파%정교시험%SSR%반응체계
Loquat%Orthogonal design%SSR%Reaction system
为探索适宜枇杷的SSR反应体系,利用正交设计对Mg2+、dNTPs、引物、Taq酶和模板DNA等5种因素4个水平进行筛选和优化。结果表明:20uL反应体系中,Mg2+、dNTPs和引物的最适浓度分别为1.5mmol.L-1、0.15mmol·L-1、0.2umol·L-1,Taq酶最适用量为1U,模板DNA最适用量为20ng;引物的最佳退火温度为51.0~60.0℃。利用该反应体系对17份枇杷种质进行扩增,电泳结果显示,不同品种间DNA谱带多态性丰富,证实该体系稳定可靠。
為探索適宜枇杷的SSR反應體繫,利用正交設計對Mg2+、dNTPs、引物、Taq酶和模闆DNA等5種因素4箇水平進行篩選和優化。結果錶明:20uL反應體繫中,Mg2+、dNTPs和引物的最適濃度分彆為1.5mmol.L-1、0.15mmol·L-1、0.2umol·L-1,Taq酶最適用量為1U,模闆DNA最適用量為20ng;引物的最佳退火溫度為51.0~60.0℃。利用該反應體繫對17份枇杷種質進行擴增,電泳結果顯示,不同品種間DNA譜帶多態性豐富,證實該體繫穩定可靠。
위탐색괄의비파적SSR반응체계,이용정교설계대Mg2+、dNTPs、인물、Taq매화모판DNA등5충인소4개수평진행사선화우화。결과표명:20uL반응체계중,Mg2+、dNTPs화인물적최괄농도분별위1.5mmol.L-1、0.15mmol·L-1、0.2umol·L-1,Taq매최괄용량위1U,모판DNA최괄용량위20ng;인물적최가퇴화온도위51.0~60.0℃。이용해반응체계대17빈비파충질진행확증,전영결과현시,불동품충간DNA보대다태성봉부,증실해체계은정가고。
In this study, SSR condition on loquat was optimizatied. Orthogonal design was applied to optimize SSR -PCR amplification system of loquat in five factors such as Mg2+ , dNTPs, primer , Taq polymerase and template DNA. The result showed that 1.5 mmol/L Mg2+, 0. 15mmol/L dNTPs, 0. 2umol/L primer, 1uTaq polymerase, 20 ng template DNA and optimal annealing temperature of primers of 51.0 -60. 0℃ in 20uL SSR reaction system were the best. Trough above PCR system, SSR fragments of 17 loquat cuhivars were obtained and detected. Polymorphism between different cuhivars was abundantly detected, which showed this system was suitable and stable.