CAJ | 학술논문

目的:观察鱼藤素对MCF-7细胞株细胞增殖和凋亡及磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B (phosphatidvlinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)信号通路的影响,旨在研究其抗肿瘤机制.方法:细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8,CCK8)检测0、1、5、10、15和20μmol/L鱼藤素作用6、24、48和72 h后对MCF-7细胞增殖的影响,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法检测细胞凋亡率,透射电子显微镜观察细胞凋亡形态,蛋白质印迹法检测细胞内PI3K/Akt通路相关分子的蛋白表达.结果:5、10、15和20 μmol/L鱼藤素作用6、24、48和72 h后能明显抑制MCF-7细胞增殖(P＜0.01),抑制率随着浓度升高和时间延长而增加,各组间两两比较差异有统计学意义(P＜0.05);而1μmol/L鱼藤素作用6、24、48和72 h后对MCF-7细胞的增殖无明显影响(P＞0.05).5、10、15和20 pmol/L鱼藤素作用6 h后能诱导MCF-7细胞凋亡,透射电子显微镜下可观察到典型的凋亡细胞形态,而相同条件下1μmol/L鱼藤素对MCF-7细胞的凋亡诱导作用不明显.5μmol/L鱼藤素作用6 h后,MCF-7细胞内磷酸化Akt(p-Akt)(Thr308)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(phosphorylated glycogen synthase kinase-3β,p-GSK-3β)(Ser9)、磷酸化磷酸肌醇依赖性激酶1(phosphorylated 3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1,p-PDK1)(Ser241)和磷酸化人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因编码的蛋白(phosphorylated phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10,p-PTEN)(Ser380)的表达量明显减少,而总Akt蛋白的表达量则无明显变化;1μmol/L鱼藤素作用6 h后,细胞内上述所有蛋白的表达量均无明显变化.结论:鱼藤素可能通过抑制PTEN(Ser380)和PDK1(Ser241)蛋白的磷酸化,进而抑制Akt(Thr308)的磷酸化,间接抑制其下游GSK-3β(Ser9)的磷酸化,最终诱导MCF-7细胞凋亡和抑制其增殖.
목적:관찰어등소대MCF-7세포주세포증식화조망급린지선기순-3격매/단백격매B (phosphatidvlinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)신호통로적영향,지재연구기항종류궤제.방법:세포계수시제합8(cell counting kit-8,CCK8)검측0、1、5、10、15화20μmol/L어등소작용6、24、48화72 h후대MCF-7세포증식적영향,막련단백V-이류청산형광소/전화병정쌍염법검측세포조망솔,투사전자현미경관찰세포조망형태,단백질인적법검측세포내PI3K/Akt통로상관분자적단백표체.결과:5、10、15화20 μmol/L어등소작용6、24、48화72 h후능명현억제MCF-7세포증식(P＜0.01),억제솔수착농도승고화시간연장이증가,각조간량량비교차이유통계학의의(P＜0.05);이1μmol/L어등소작용6、24、48화72 h후대MCF-7세포적증식무명현영향(P＞0.05).5、10、15화20 pmol/L어등소작용6 h후능유도MCF-7세포조망,투사전자현미경하가관찰도전형적조망세포형태,이상동조건하1μmol/L어등소대MCF-7세포적조망유도작용불명현.5μmol/L어등소작용6 h후,MCF-7세포내린산화Akt(p-Akt)(Thr308)、린산화당원합성매격매-3β(phosphorylated glycogen synthase kinase-3β,p-GSK-3β)(Ser9)、린산화린산기순의뢰성격매1(phosphorylated 3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1,p-PDK1)(Ser241)화린산화인제10호염색체결실적린산매급장력단백동원적기인편마적단백(phosphorylated phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10,p-PTEN)(Ser380)적표체량명현감소,이총Akt단백적표체량칙무명현변화;1μmol/L어등소작용6 h후,세포내상술소유단백적표체량균무명현변화.결론:어등소가능통과억제PTEN(Ser380)화PDK1(Ser241)단백적린산화,진이억제Akt(Thr308)적린산화,간접억제기하유GSK-3β(Ser9)적린산화,최종유도MCF-7세포조망화억제기증식.