CAJ | 학술논문

从广西大学农场陈旧稻草堆中分离出1株具有降解天然纤维素稻草粉、甘蔗渣粉活性的细菌GXN151,经形态观察、16S rDNA序列分析和丙酸盐利用试验将其鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis).通过连接经BamHI酶切的pBluescript KS(+)和回收得到的经Sau3AI部分酶切的GXN151的3～10 kb DNA在大肠杆菌JM109中构建了该菌的含7 099个克隆的基因文库,文库克隆中插入片段最大的为11.0 kb,最小的为3.1 kb,平均大小为4.6 kb,含GXN151基因组中任一基因的概率P为99.6%.筛选该文库获得8个表达羧甲基纤维素酶活性的克隆, DNA测序和PCR分析表明,该8个克隆可归为3类不重叠的独立克隆,其中一个克隆pGXNL2的测序分析表明其上的cel5A基因为1 626 bp,可编码含542个氨基酸的羧甲基纤维素酶,Cel5A的N-末端的42个氨基酸具有信号肽特征,它的第66～321氨基酸为家族5糖基水解酶(glycosyl hydrolase)功能域、第391～472氨基酸为家族3碳水化合物结合组件(carbohydrate-binding module,CBM).本工作首次报道地衣芽孢杆菌能降解结晶纤维素及从该种细菌中克隆到纤维素酶基因.
종엄서대학농장진구도초퇴중분리출1주구유강해천연섬유소도초분、감자사분활성적세균GXN151,경형태관찰、16S rDNA서렬분석화병산염이용시험장기감정위지의아포간균(Bacillus licheniformis).통과련접경BamHI매절적pBluescript KS(+)화회수득도적경Sau3AI부분매절적GXN151적3～10 kb DNA재대장간균JM109중구건료해균적함7 099개극륭적기인문고,문고극륭중삽입편단최대적위11.0 kb,최소적위3.1 kb,평균대소위4.6 kb,함GXN151기인조중임일기인적개솔P위99.6%.사선해문고획득8개표체최갑기섬유소매활성적극륭, DNA측서화PCR분석표명,해8개극륭가귀위3류불중첩적독립극륭,기중일개극륭pGXNL2적측서분석표명기상적cel5A기인위1 626 bp,가편마함542개안기산적최갑기섬유소매,Cel5A적N-말단적42개안기산구유신호태특정,타적제66～321안기산위가족5당기수해매(glycosyl hydrolase)공능역、제391～472안기산위가족3탄수화합물결합조건(carbohydrate-binding module,CBM).본공작수차보도지의아포간균능강해결정섬유소급종해충세균중극륭도섬유소매기인.