CAJ | 학술논문

背景:研究发现脂肪间充质干细胞核型具有不稳定性,且干细胞移植后长期安全评价等问题尚未从根本上得到解决.目的:观察体外分离培养的人脂肪间充质干细胞传代培养的遗传稳定性.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-03/11在解放军兰州军区兰州总医院骨科研究中心完成.材料:成人腹部大网膜脂肪组织来源于单纯性阑尾炎患者,由解放军兰州军区兰州总医院普通外科提供.方法:胶原酶消化法体外分离培养人脂肪间充质干细胞,加入含体积分数为10%胎牛血清的HG-DMEM培养基吹打细胞沉淀,过滤后于37℃、体积分数为5%的CO2饱和湿度条件下培养,待细胞生长至70%～80%融合时消化传代.分别取第3,25,30代脂肪间充质干细胞进行相关指标检测.主要观察指标:脂肪间充质干细胞表面标志表达、细胞增殖、核型分析、超微结构电镜观察、恶性肿瘤特异性生长因子的表达.结果:第3代脂肪间充质干细胞CD13,CD44,CD59均呈阳性表达,而造血干细胞表面标志CD34及成纤维细胞表面标志HLA-DR均呈阴性表达:染色体的形态、结构和数目均未见异常,呈二倍体结构;镜下可见完整的高尔基复合体,数量较多的粗面内质网,部分糖元颗粒分布在胞浆中.第25代脂肪间充质干细胞分裂增殖作用强于第3代脂肪间充质干细胞;多条染色体出现断裂畸变,并且染色体数目出现异常,呈亚二倍体或超二倍体核型;核仁增大,异染色质及线粒体数量增多,内质网数量少,细胞较为幼稚.第3,25,30代脂肪间充质干细胞恶性肿瘤特异性生长因子的表达吸光度值无明显差异(P>0.05).结论:分离获得的人脂肪间充质干细胞长期体外培养具有遗传不稳定性,有向肿瘤细胞突变的倾向.
배경:연구발현지방간충질간세포핵형구유불은정성,차간세포이식후장기안전평개등문제상미종근본상득도해결.목적:관찰체외분리배양적인지방간충질간세포전대배양적유전은정성.설계、시간급지점:세포학체외관찰,우2008-03/11재해방군란주군구란주총의원골과연구중심완성.재료:성인복부대망막지방조직래원우단순성란미염환자,유해방군란주군구란주총의원보통외과제공.방법:효원매소화법체외분리배양인지방간충질간세포,가입함체적분수위10%태우혈청적HG-DMEM배양기취타세포침정,과려후우37℃、체적분수위5%적CO2포화습도조건하배양,대세포생장지70%～80%융합시소화전대.분별취제3,25,30대지방간충질간세포진행상관지표검측.주요관찰지표:지방간충질간세포표면표지표체、세포증식、핵형분석、초미결구전경관찰、악성종류특이성생장인자적표체.결과:제3대지방간충질간세포CD13,CD44,CD59균정양성표체,이조혈간세포표면표지CD34급성섬유세포표면표지HLA-DR균정음성표체:염색체적형태、결구화수목균미견이상,정이배체결구;경하가견완정적고이기복합체,수량교다적조면내질망,부분당원과립분포재포장중.제25대지방간충질간세포분렬증식작용강우제3대지방간충질간세포;다조염색체출현단렬기변,병차염색체수목출현이상,정아이배체혹초이배체핵형;핵인증대,이염색질급선립체수량증다,내질망수량소,세포교위유치.제3,25,30대지방간충질간세포악성종류특이성생장인자적표체흡광도치무명현차이(P>0.05).결론:분리획득적인지방간충질간세포장기체외배양구유유전불은정성,유향종류세포돌변적경향.