CAJ | 학술논문

软骨细胞条件性敲除PTEN基因的FGFR3功能增强型点突变小鼠的获得及其表型初步分析
연골세포조건성고제PTEN기인적FGFR3공능증강형점돌변소서적획득급기표형초보분석
Initial phenotype analysis on chondrocyte PTEN conditional knockout mice generation from FGFR3 gain of function mutant

万方数据

中国骨质疏松杂志中國骨質疏鬆雜誌 중국골질소송잡지
CHINESE JOURNAL OF OSTEOPOROSIS
2009年 1期 9-15 ,共7页

雷子贤%戚华兵%苏楠%赵子瑜%陈锚锚%何启芬%赵玲%金旻%谢杨丽%李福兵%杜晓兰%陈林

뢰자현%척화병%소남%조자유%진묘묘%하계분%조령%금민%사양려%리복병%두효란%진림

PTEN%FGFR3%软骨发育不全%条件性基因敲除%小鼠 PTEN%FGFR3%軟骨髮育不全%條件性基因敲除%小鼠
PTEN%FGFR3%연골발육불전%조건성기인고제%소서

目的获得在软骨细胞中条件性敲除PIEN基因的FGFR3增强型点突变小鼠并进行初步表型分析.方法通过FTEN条件性基因敲除小鼠(Ptenflox/flox小鼠),与软骨细胞特异表达Cre重组酶的小鼠(Col2aCre)交配,获得在软骨细胞中特异敲除PTEN基因小鼠(Col2aCre:Ptenfolox/flox);同时,利用Ptenflox/flox小鼠与FGFR3增强型点突变小鼠(Fgfr3G369C/+小鼠,即ACH小鼠)交配,子代杂合子小鼠(Ptenflax/:ACH)之间再交配,获得Ptenflox/flox:ACH小鼠;通过Col2aCre:Ptenflox/flox和Ptenflox/flox:ACH交配即可获得在软骨细胞中特异性敲除PTEN基因的FGFB3增强型点突变小鼠((Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH).采用PCR对小鼠基冈型进行鉴定,免疫荧光染色检测PTEN基因的敲除效率,通过X光平片摄影对小鼠的表型进行初步分析.结果获得了在软骨细胞中敲除PTEN的FGFR3点突变小鼠,免疫荧光染色证实Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH小鼠软骨细胞中PTEN蛋白因为基因敲除而表达很低.初步的表型分析显示:Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH小鼠身长、尾长均较Pten flox/flox:ACH小鼠长(P＜0.05,n=5).Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH小鼠表型,较Ptenflox/flox:ACH小鼠的侏儒表型有所缓解.结论采用基于Cre/LoxP系统的条件性基因敲除策略,获得了在软骨细胞中敲除PTEN基因的FGFR3增强型突变小鼠,表型分析初步显示,软骨细胞特异性敲除PTEN基因可部分缓解由FGFR3增强型点突变所导致的小鼠侏儒表型.该小鼠的获得,为研究P13K/AKT信号通路在FGFR3突变介导的软骨生长抑制中的作用提供了实验动物平台.
목적 획득재연골세포중조건성고제PIEN기인적FGFR3증강형점돌변소서병진행초보표형분석.방법 통과FTEN조건성기인고제소서(Ptenflox/flox소서),여연골세포특이표체Cre중조매적소서(Col2aCre)교배,획득재연골세포중특이고제PTEN기인소서(Col2aCre:Ptenfolox/flox);동시,이용Ptenflox/flox소서여FGFR3증강형점돌변소서(Fgfr3G369C/+소서,즉ACH소서)교배,자대잡합자소서(Ptenflax/:ACH)지간재교배,획득Ptenflox/flox:ACH소서;통과Col2aCre:Ptenflox/flox화Ptenflox/flox:ACH교배즉가획득재연골세포중특이성고제PTEN기인적FGFB3증강형점돌변소서((Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH).채용PCR대소서기강형진행감정,면역형광염색검측PTEN기인적고제효솔,통과X광평편섭영대소서적표형진행초보분석.결과 획득료재연골세포중고제PTEN적FGFR3점돌변소서,면역형광염색증실Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH소서연골세포중PTEN단백인위기인고제이표체흔저.초보적표형분석현시:Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH소서신장、미장균교Pten flox/flox:ACH소서장(P＜0.05,n=5).Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH소서표형,교Ptenflox/flox:ACH소서적주유표형유소완해.결론 채용기우Cre/LoxP계통적조건성기인고제책략,획득료재연골세포중고제PTEN기인적FGFR3증강형돌변소서,표형분석초보현시,연골세포특이성고제PTEN기인가부분완해유FGFR3증강형점돌변소도치적소서주유표형.해소서적획득,위연구P13K/AKT신호통로재FGFR3돌변개도적연골생장억제중적작용제공료실험동물평태.