吉林农业大学学报
吉林農業大學學報
길임농업대학학보
JOURNAL OF JILIN AGRICUL TURAL UNIVERSITY
2008年
6期
846-848,857
,共4页
艾永兴%郝军元%肖昌%邹亚学%郑梅竹%张玉静
艾永興%郝軍元%肖昌%鄒亞學%鄭梅竹%張玉靜
애영흥%학군원%초창%추아학%정매죽%장옥정
鸡p15INK4B%单克隆抗体%杂交瘤细胞%Western-blot
鷄p15INK4B%單剋隆抗體%雜交瘤細胞%Western-blot
계p15INK4B%단극륭항체%잡교류세포%Western-blot
用制备并纯化的鸡p15INK4B蛋白免疫BALB/c小鼠,制备了p15INK4B蛋白的单克隆抗体,并进行了鉴定.结果表明:2株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株1C6和3F5分别属于IgG1和IgM抗体亚类;培养上清的效价分别为1:820和1:680,腹水的效价分别为1:4 X 106和1:7 X 105;2株单克隆抗体亲和力常数分别为3.13×109 L/mol(1C6)和1.24X 108 L/mol(3F5),相对亲和力1C6>3F5,且具有不同的抗原识别位点;Westem-blot鉴定表明,1C6和3F5这2株单克隆抗体均能与原核表达纯化的和杆状病毒表达的p15INK4B蛋白结合,而不与其他蛋白结合,说明本研究成功制备了鸡p15INK4B的单克隆抗体,可作为深入研究鸡p15INK4B蛋白的功能提供特异的抗体材料.
用製備併純化的鷄p15INK4B蛋白免疫BALB/c小鼠,製備瞭p15INK4B蛋白的單剋隆抗體,併進行瞭鑒定.結果錶明:2株分泌單剋隆抗體的雜交瘤細胞株1C6和3F5分彆屬于IgG1和IgM抗體亞類;培養上清的效價分彆為1:820和1:680,腹水的效價分彆為1:4 X 106和1:7 X 105;2株單剋隆抗體親和力常數分彆為3.13×109 L/mol(1C6)和1.24X 108 L/mol(3F5),相對親和力1C6>3F5,且具有不同的抗原識彆位點;Westem-blot鑒定錶明,1C6和3F5這2株單剋隆抗體均能與原覈錶達純化的和桿狀病毒錶達的p15INK4B蛋白結閤,而不與其他蛋白結閤,說明本研究成功製備瞭鷄p15INK4B的單剋隆抗體,可作為深入研究鷄p15INK4B蛋白的功能提供特異的抗體材料.
용제비병순화적계p15INK4B단백면역BALB/c소서,제비료p15INK4B단백적단극륭항체,병진행료감정.결과표명:2주분비단극륭항체적잡교류세포주1C6화3F5분별속우IgG1화IgM항체아류;배양상청적효개분별위1:820화1:680,복수적효개분별위1:4 X 106화1:7 X 105;2주단극륭항체친화력상수분별위3.13×109 L/mol(1C6)화1.24X 108 L/mol(3F5),상대친화력1C6>3F5,차구유불동적항원식별위점;Westem-blot감정표명,1C6화3F5저2주단극륭항체균능여원핵표체순화적화간상병독표체적p15INK4B단백결합,이불여기타단백결합,설명본연구성공제비료계p15INK4B적단극륭항체,가작위심입연구계p15INK4B단백적공능제공특이적항체재료.
