中国修复重建外科杂志
中國脩複重建外科雜誌
중국수복중건외과잡지
CHINESE JOURNAL OF REPARATIVE AND RECONSTRUCTIVE SURGERY
2008年
12期
1476-1480
,共5页
智伟%杨志明%陈晓禾%李秀群%韩平%谭美云%唐耘熳%邓力
智偉%楊誌明%陳曉禾%李秀群%韓平%譚美雲%唐耘熳%鄧力
지위%양지명%진효화%리수군%한평%담미운%당운만%산력
组织工程膀胱%平滑肌细胞%细胞培养%犬
組織工程膀胱%平滑肌細胞%細胞培養%犬
조직공정방광%평활기세포%세포배양%견
目的 通过体外培养不同代次的犬膀胱平滑肌细胞,比较其生物学特征,探讨多次传代后的平滑肌细胞作为种子细胞的可行性,为构建组织工程膀胱和尿道筛选种子细胞提供方法和依据.方法 取体重10～12 kg的12月龄雄性犬膀胱肌层,混合酶消化法获取平滑肌细胞,并于含10%小牛血清的培养基中培养,观察比较不同代次细胞的形态变化及生长、增殖过程,电镜下观察细胞超微结构,并通过免疫组织化学方法检测特征性蛋白的表达.结果 体外培养的平滑肌细胞单层生长至亚融合状态后,倒置相差显微镜下细胞呈长梭形,并呈峰-谷样结构,可连续传至12代.生长曲线显示第7代以前的细胞具有相似的增殖特点,约每40小时为1次生长周期,透射电镜下可见平滑肌细胞特有的密体结构,平滑肌肌动蛋白免疫组织化学染色为阳性;第7代后细胞增殖逐渐迟滞,至第10代细胞内肌丝及密体结构消失.结论 犬膀胱平滑肌细胞可在体外连续培养,通过适当的纯化方法可获得大量高纯度的平滑肌细胞.第7代以前的甲滑肌细胞均可作为种子细胞,用于构建组织工程膀胱和尿道.
目的 通過體外培養不同代次的犬膀胱平滑肌細胞,比較其生物學特徵,探討多次傳代後的平滑肌細胞作為種子細胞的可行性,為構建組織工程膀胱和尿道篩選種子細胞提供方法和依據.方法 取體重10～12 kg的12月齡雄性犬膀胱肌層,混閤酶消化法穫取平滑肌細胞,併于含10%小牛血清的培養基中培養,觀察比較不同代次細胞的形態變化及生長、增殖過程,電鏡下觀察細胞超微結構,併通過免疫組織化學方法檢測特徵性蛋白的錶達.結果 體外培養的平滑肌細胞單層生長至亞融閤狀態後,倒置相差顯微鏡下細胞呈長梭形,併呈峰-穀樣結構,可連續傳至12代.生長麯線顯示第7代以前的細胞具有相似的增殖特點,約每40小時為1次生長週期,透射電鏡下可見平滑肌細胞特有的密體結構,平滑肌肌動蛋白免疫組織化學染色為暘性;第7代後細胞增殖逐漸遲滯,至第10代細胞內肌絲及密體結構消失.結論 犬膀胱平滑肌細胞可在體外連續培養,通過適噹的純化方法可穫得大量高純度的平滑肌細胞.第7代以前的甲滑肌細胞均可作為種子細胞,用于構建組織工程膀胱和尿道.
목적 통과체외배양불동대차적견방광평활기세포,비교기생물학특정,탐토다차전대후적평활기세포작위충자세포적가행성,위구건조직공정방광화뇨도사선충자세포제공방법화의거.방법 취체중10～12 kg적12월령웅성견방광기층,혼합매소화법획취평활기세포,병우함10%소우혈청적배양기중배양,관찰비교불동대차세포적형태변화급생장、증식과정,전경하관찰세포초미결구,병통과면역조직화학방법검측특정성단백적표체.결과 체외배양적평활기세포단층생장지아융합상태후,도치상차현미경하세포정장사형,병정봉-곡양결구,가련속전지12대.생장곡선현시제7대이전적세포구유상사적증식특점,약매40소시위1차생장주기,투사전경하가견평활기세포특유적밀체결구,평활기기동단백면역조직화학염색위양성;제7대후세포증식축점지체,지제10대세포내기사급밀체결구소실.결론 견방광평활기세포가재체외련속배양,통과괄당적순화방법가획득대량고순도적평활기세포.제7대이전적갑활기세포균가작위충자세포,용우구건조직공정방광화뇨도.
