西南大学学报（自然科学版）
西南大學學報（自然科學版）
서남대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SOUTHWEST AGRICULTURAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2008年
3期
84-89
,共6页
武文明%曾昭淳%李小彦%杨小兰%廖飞
武文明%曾昭淳%李小彥%楊小蘭%廖飛
무문명%증소순%리소언%양소란%료비
产朊假丝酵母%尿酸酶%高尿酸血症
產朊假絲酵母%尿痠酶%高尿痠血癥
산원가사효모%뇨산매%고뇨산혈증
产朊假丝酵母尿酸酶经2次DEAE-cellulose 52层析后比活性提高20倍以上, SDS-PAGE分析发现其含一种约33.0 kD多肽, Sephadex G-200层析发现此天然尿酸酶分子量约134.0 kD. MALDI-TOF-MS分析比活性＞7.0 U/mg样品没有检测到单一肽链, 而丰度最高成分为67.7 kD, 次高成分为131.4 kD. 此酶最适pH值接近8.8, 在pH 7.4时可保留50%以上活性, 37 ℃时4 h内稳定, 米氏常数为(32.8±3.1)μmol/L(n=10), 黄嘌呤的抑制常数为(4.8±0.2)μmol/L(n=3);用蒸馏水透析后失活90%以上, 且随后加NaCl处理后酶活性不能恢复. Cu2+ 和Fe3+在1.0 mmol/L时对此酶有明显抑制作用. 这些结果表明此尿酸酶需通过分子工程改造才能用作治疗高尿酸血症相关疾病的药物.
產朊假絲酵母尿痠酶經2次DEAE-cellulose 52層析後比活性提高20倍以上, SDS-PAGE分析髮現其含一種約33.0 kD多肽, Sephadex G-200層析髮現此天然尿痠酶分子量約134.0 kD. MALDI-TOF-MS分析比活性＞7.0 U/mg樣品沒有檢測到單一肽鏈, 而豐度最高成分為67.7 kD, 次高成分為131.4 kD. 此酶最適pH值接近8.8, 在pH 7.4時可保留50%以上活性, 37 ℃時4 h內穩定, 米氏常數為(32.8±3.1)μmol/L(n=10), 黃嘌呤的抑製常數為(4.8±0.2)μmol/L(n=3);用蒸餾水透析後失活90%以上, 且隨後加NaCl處理後酶活性不能恢複. Cu2+ 和Fe3+在1.0 mmol/L時對此酶有明顯抑製作用. 這些結果錶明此尿痠酶需通過分子工程改造纔能用作治療高尿痠血癥相關疾病的藥物.
산원가사효모뇨산매경2차DEAE-cellulose 52층석후비활성제고20배이상, SDS-PAGE분석발현기함일충약33.0 kD다태, Sephadex G-200층석발현차천연뇨산매분자량약134.0 kD. MALDI-TOF-MS분석비활성＞7.0 U/mg양품몰유검측도단일태련, 이봉도최고성분위67.7 kD, 차고성분위131.4 kD. 차매최괄pH치접근8.8, 재pH 7.4시가보류50%이상활성, 37 ℃시4 h내은정, 미씨상수위(32.8±3.1)μmol/L(n=10), 황표령적억제상수위(4.8±0.2)μmol/L(n=3);용증류수투석후실활90%이상, 차수후가NaCl처리후매활성불능회복. Cu2+ 화Fe3+재1.0 mmol/L시대차매유명현억제작용. 저사결과표명차뇨산매수통과분자공정개조재능용작치료고뇨산혈증상관질병적약물.
