山东大学学报（医学版）
山東大學學報（醫學版）
산동대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2008年
1期
68-71,封2
,共5页
王炳花%陶泽新%王丽娟%曹海霞%王志玉
王炳花%陶澤新%王麗娟%曹海霞%王誌玉
왕병화%도택신%왕려연%조해하%왕지옥
汉坦病毒%包膜糖蛋白%表达载体%细胞融合
漢坦病毒%包膜糖蛋白%錶達載體%細胞融閤
한탄병독%포막당단백%표체재체%세포융합
目的 构建汉坦病毒GM04-38株包膜糖蛋白G1、G2的真核表达载体并将其在Vero E6细胞中进行表达,观察细胞融合现象.方法 采用PCR和基因克隆技术,将GM04-38株G1、G2基因分别克隆到表达载体pCAGGS/MCS,酶切和测序鉴定正确后,将表达载体pCAGGS-G1、pCAGGS-G2共转染Vero E6细胞,酸性MEM处理后观察细胞融合现象的产生,并以间接免疫荧光试验(IFA)观察糖蛋白的表达情况.结果 显示在Vero E6细胞中成功表达出糖蛋白G1、G2,IFA显示荧光信号分布在细胞浆中.二者的共表达可产生良好的生物学活性,在偏酸性条件下引起Vero E6细胞发生融合,而转染pCAGGS-NP的细胞没有融合现象发生.共表达也未出现明显的促进效应.结论 成功构建了糖蛋白G1、G2的表达载体,并在Vero E6细胞中呈有效表达,二者的共表达可在偏酸性条件下引起Vero E6细胞发生融合.
目的 構建漢坦病毒GM04-38株包膜糖蛋白G1、G2的真覈錶達載體併將其在Vero E6細胞中進行錶達,觀察細胞融閤現象.方法 採用PCR和基因剋隆技術,將GM04-38株G1、G2基因分彆剋隆到錶達載體pCAGGS/MCS,酶切和測序鑒定正確後,將錶達載體pCAGGS-G1、pCAGGS-G2共轉染Vero E6細胞,痠性MEM處理後觀察細胞融閤現象的產生,併以間接免疫熒光試驗(IFA)觀察糖蛋白的錶達情況.結果 顯示在Vero E6細胞中成功錶達齣糖蛋白G1、G2,IFA顯示熒光信號分佈在細胞漿中.二者的共錶達可產生良好的生物學活性,在偏痠性條件下引起Vero E6細胞髮生融閤,而轉染pCAGGS-NP的細胞沒有融閤現象髮生.共錶達也未齣現明顯的促進效應.結論 成功構建瞭糖蛋白G1、G2的錶達載體,併在Vero E6細胞中呈有效錶達,二者的共錶達可在偏痠性條件下引起Vero E6細胞髮生融閤.
목적 구건한탄병독GM04-38주포막당단백G1、G2적진핵표체재체병장기재Vero E6세포중진행표체,관찰세포융합현상.방법 채용PCR화기인극륭기술,장GM04-38주G1、G2기인분별극륭도표체재체pCAGGS/MCS,매절화측서감정정학후,장표체재체pCAGGS-G1、pCAGGS-G2공전염Vero E6세포,산성MEM처리후관찰세포융합현상적산생,병이간접면역형광시험(IFA)관찰당단백적표체정황.결과 현시재Vero E6세포중성공표체출당단백G1、G2,IFA현시형광신호분포재세포장중.이자적공표체가산생량호적생물학활성,재편산성조건하인기Vero E6세포발생융합,이전염pCAGGS-NP적세포몰유융합현상발생.공표체야미출현명현적촉진효응.결론 성공구건료당단백G1、G2적표체재체,병재Vero E6세포중정유효표체,이자적공표체가재편산성조건하인기Vero E6세포발생융합.
