军医进修学院学报
軍醫進脩學院學報
군의진수학원학보
ACADEMIC JOURNAL OF PLA POSTGRADUATE MEDICAL SCHOOL
2007年
6期
439-441
,共3页
杨(契)%韩为东%赵亚力%伍志强%田丽媛%陈美霞%张燕
楊(契)%韓為東%趙亞力%伍誌彊%田麗媛%陳美霞%張燕
양(계)%한위동%조아력%오지강%전려원%진미하%장연
LRP16%质粒%双杂交技术%基因文库
LRP16%質粒%雙雜交技術%基因文庫
LRP16%질립%쌍잡교기술%기인문고
目的:应用酵母双杂交技术筛选人乳腺癌细胞MCF-7中可与LRP16相互作用的蛋白.方法:将诱饵质粒pGBKT7-LRP16、MCF-7双链cDNA文库片段及线性化质粒pGADT7-Rec共转化AH109酵母菌,营养缺陷型培养基(SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade)筛选阳性菌落.提取阳性克隆质粒进行PCR,将PCR产物测序,并将酵母质粒转化感受态大肠杆菌Top10获得与诱饵质粒有相互作用的单个文库质粒,测序后回复验证其在酵母中的相互作用.结果:获得8个与LRP16相互作用的候选蛋白,选取4个在酵母中进行回复验证,其中有3个可生长出阳性克隆.结论:应用酵母双杂交技术筛选出一族功能基本明确的可与LRP16相互作用的候选蛋白,为研究LRP16的病理生理功能和分子机制奠定了基础.
目的:應用酵母雙雜交技術篩選人乳腺癌細胞MCF-7中可與LRP16相互作用的蛋白.方法:將誘餌質粒pGBKT7-LRP16、MCF-7雙鏈cDNA文庫片段及線性化質粒pGADT7-Rec共轉化AH109酵母菌,營養缺陷型培養基(SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade)篩選暘性菌落.提取暘性剋隆質粒進行PCR,將PCR產物測序,併將酵母質粒轉化感受態大腸桿菌Top10穫得與誘餌質粒有相互作用的單箇文庫質粒,測序後迴複驗證其在酵母中的相互作用.結果:穫得8箇與LRP16相互作用的候選蛋白,選取4箇在酵母中進行迴複驗證,其中有3箇可生長齣暘性剋隆.結論:應用酵母雙雜交技術篩選齣一族功能基本明確的可與LRP16相互作用的候選蛋白,為研究LRP16的病理生理功能和分子機製奠定瞭基礎.
목적:응용효모쌍잡교기술사선인유선암세포MCF-7중가여LRP16상호작용적단백.방법:장유이질립pGBKT7-LRP16、MCF-7쌍련cDNA문고편단급선성화질립pGADT7-Rec공전화AH109효모균,영양결함형배양기(SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade)사선양성균락.제취양성극륭질립진행PCR,장PCR산물측서,병장효모질립전화감수태대장간균Top10획득여유이질립유상호작용적단개문고질립,측서후회복험증기재효모중적상호작용.결과:획득8개여LRP16상호작용적후선단백,선취4개재효모중진행회복험증,기중유3개가생장출양성극륭.결론:응용효모쌍잡교기술사선출일족공능기본명학적가여LRP16상호작용적후선단백,위연구LRP16적병리생리공능화분자궤제전정료기출.
