菌物学报
菌物學報
균물학보
MYCOSYSTEMA
2007年
4期
539-548
,共10页
黄乾明%杨婉身%陈华萍%张寒飞%刘一江%谢君
黃乾明%楊婉身%陳華萍%張寒飛%劉一江%謝君
황건명%양완신%진화평%장한비%류일강%사군
合成染料%脱色%苹果汁%多酚
閤成染料%脫色%蘋果汁%多酚
합성염료%탈색%평과즙%다분
粗毛栓菌Trametes gallica诱变菌株SAH-12是通过紫外诱变选育所得的漆酶高产菌株,Active-PAGE分析表明SAH-12在高氮低碳无机盐培养液(LM3)中至少分泌3种漆酶同工酶(Lac1、Lac2、Lac3).采用硫酸铵盐析、透析和Sephadex-G75分子筛层析从其培养液中分离纯化得到电泳纯的Lac1,纯化倍数6.54,酶活性回收59.7%.Lac1经SDS-PAGE验证为一条带,其表观分子量为61.5kDa.Lac1为一种糖蛋白,含糖量11.6%,等电点pI 4.40,催化氧化底物ABTS的最适反应温度为60C,最适pH为2.6,Km值为25μmol/L.Lac1在40C(pH4.0)以下和pH1.5～5.0(28℃)范围内稳定.金属离子Fe2+、Ag+、Hg2+和Cr3+与抑制剂DTT、SDS、EDTA和DMSO对Lac1有抑制作用,其中Fe2+和DTT完全抑制酶活,而Cu2+对酶有明显激活作用,Mn2+、Zn2+对酶活影响不大.Lac1不仅可使一些合成染料明显脱色,而且对苹果汁多酚祛除也有较好效果.40℃用该酶(1U/mL)处理苹果汁5h,其多酚含量可降低40%.
粗毛栓菌Trametes gallica誘變菌株SAH-12是通過紫外誘變選育所得的漆酶高產菌株,Active-PAGE分析錶明SAH-12在高氮低碳無機鹽培養液(LM3)中至少分泌3種漆酶同工酶(Lac1、Lac2、Lac3).採用硫痠銨鹽析、透析和Sephadex-G75分子篩層析從其培養液中分離純化得到電泳純的Lac1,純化倍數6.54,酶活性迴收59.7%.Lac1經SDS-PAGE驗證為一條帶,其錶觀分子量為61.5kDa.Lac1為一種糖蛋白,含糖量11.6%,等電點pI 4.40,催化氧化底物ABTS的最適反應溫度為60C,最適pH為2.6,Km值為25μmol/L.Lac1在40C(pH4.0)以下和pH1.5～5.0(28℃)範圍內穩定.金屬離子Fe2+、Ag+、Hg2+和Cr3+與抑製劑DTT、SDS、EDTA和DMSO對Lac1有抑製作用,其中Fe2+和DTT完全抑製酶活,而Cu2+對酶有明顯激活作用,Mn2+、Zn2+對酶活影響不大.Lac1不僅可使一些閤成染料明顯脫色,而且對蘋果汁多酚祛除也有較好效果.40℃用該酶(1U/mL)處理蘋果汁5h,其多酚含量可降低40%.
조모전균Trametes gallica유변균주SAH-12시통과자외유변선육소득적칠매고산균주,Active-PAGE분석표명SAH-12재고담저탄무궤염배양액(LM3)중지소분비3충칠매동공매(Lac1、Lac2、Lac3).채용류산안염석、투석화Sephadex-G75분자사층석종기배양액중분리순화득도전영순적Lac1,순화배수6.54,매활성회수59.7%.Lac1경SDS-PAGE험증위일조대,기표관분자량위61.5kDa.Lac1위일충당단백,함당량11.6%,등전점pI 4.40,최화양화저물ABTS적최괄반응온도위60C,최괄pH위2.6,Km치위25μmol/L.Lac1재40C(pH4.0)이하화pH1.5～5.0(28℃)범위내은정.금속리자Fe2+、Ag+、Hg2+화Cr3+여억제제DTT、SDS、EDTA화DMSO대Lac1유억제작용,기중Fe2+화DTT완전억제매활,이Cu2+대매유명현격활작용,Mn2+、Zn2+대매활영향불대.Lac1불부가사일사합성염료명현탈색,이차대평과즙다분거제야유교호효과.40℃용해매(1U/mL)처리평과즙5h,기다분함량가강저40%.
